Calcio
Páginas: 2 (386 palabras)
Publicado: 15 de septiembre de 2015
PRÁCTICA No. 3
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CALCIO SÉRICO
METODO COLORIMÉTRICO Y DE PRECIPITACIÓN (Ácido Cloranílico).7
FUNDAMENTO:
El Acido Cloranílico(2,5-dicloro-3,6-dihidroxi-2,5-ciclohexadieno-1,4-diona) precipita al Calcio presente en la muestra biológica, formando cloranilato de calcio, el cual se disuelve con solución de EDTA y forma cloranilato de sodio soluble de color rosa. Laintensidad del color es directamente proporcional a la concentración de Calcio en la muestra. El alcohol isopropílico elimina el exceso de acido cloranílico del precipitado.
REACTIVOS
1. ACIDOCLORANILICO
2. SOLUCION DE EDTA AL 6%
3. ALCOHOL ISOPROPILICO AL 50%
4. SOLUCION ESTANDAR DE Calcio de 10 mg%
MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIÓN
MATERIAL PARA TOMA DE MUESTRAMATERIAL PARA LA PRUEBA
MATERIAL PARA LA CURVA DE CALIBRACIÓN
INSTRUMENTACIÓNCentrífuga
Espectrofotómetro
Baño María a 37°C
TÉCNICA
1. En un tubo de ensaye coloque 2 ml de suero. Añada 1 ml de Acido Cloranílico. Mezcle SIN INVERTIR. Dejereaccionar durante 30 minutos, ó 15 minutos a 37°C
2. Centrifugue a 2800 rpm por 10 min (optimice tiempo y velocidad)
3. Decante el líquido sobrenadante y deje reposar durante 3 minutos sobre papelfiltro. Seque la boca del tubo con el papel filtro.
4. Lave el precipitado con 5 o 7 ml de alcohol isopropílico
5. Centrifugue y elimine el sobrenadante de la misma forma anterior
6. Añada al precipitado2 gotas de EDTA y resuspenda PERFECTAMENTE el precipitado
7. Añada 6 ml de solución de EDTA tape tubo y agite por inversión hasta solubilizar precipitado totalmente. Es recomendable mezclar por unosminutos. No debe presentar turbidez (de hacerlo significa lavado inadecuado con isopropílico). Deje reaccionar por 10 minutos a TA.
8. Lea a 520 nm ajustando a 0 de Absorbancia con B de agua...
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE CALCIO SÉRICO
METODO COLORIMÉTRICO Y DE PRECIPITACIÓN (Ácido Cloranílico).7
FUNDAMENTO:
El Acido Cloranílico(2,5-dicloro-3,6-dihidroxi-2,5-ciclohexadieno-1,4-diona) precipita al Calcio presente en la muestra biológica, formando cloranilato de calcio, el cual se disuelve con solución de EDTA y forma cloranilato de sodio soluble de color rosa. Laintensidad del color es directamente proporcional a la concentración de Calcio en la muestra. El alcohol isopropílico elimina el exceso de acido cloranílico del precipitado.
REACTIVOS
1. ACIDOCLORANILICO
2. SOLUCION DE EDTA AL 6%
3. ALCOHOL ISOPROPILICO AL 50%
4. SOLUCION ESTANDAR DE Calcio de 10 mg%
MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIÓN
MATERIAL PARA TOMA DE MUESTRAMATERIAL PARA LA PRUEBA
MATERIAL PARA LA CURVA DE CALIBRACIÓN
INSTRUMENTACIÓNCentrífuga
Espectrofotómetro
Baño María a 37°C
TÉCNICA
1. En un tubo de ensaye coloque 2 ml de suero. Añada 1 ml de Acido Cloranílico. Mezcle SIN INVERTIR. Dejereaccionar durante 30 minutos, ó 15 minutos a 37°C
2. Centrifugue a 2800 rpm por 10 min (optimice tiempo y velocidad)
3. Decante el líquido sobrenadante y deje reposar durante 3 minutos sobre papelfiltro. Seque la boca del tubo con el papel filtro.
4. Lave el precipitado con 5 o 7 ml de alcohol isopropílico
5. Centrifugue y elimine el sobrenadante de la misma forma anterior
6. Añada al precipitado2 gotas de EDTA y resuspenda PERFECTAMENTE el precipitado
7. Añada 6 ml de solución de EDTA tape tubo y agite por inversión hasta solubilizar precipitado totalmente. Es recomendable mezclar por unosminutos. No debe presentar turbidez (de hacerlo significa lavado inadecuado con isopropílico). Deje reaccionar por 10 minutos a TA.
8. Lea a 520 nm ajustando a 0 de Absorbancia con B de agua...
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