Características de separación de las membranas de diálisis
Páginas: 8 (1955 palabras)
Publicado: 18 de septiembre de 2015
Características de separación de las membranas de diálisis
La diálisis es una técnica clásica de laboratorio que se basa en la difusión selectiva de moléculas a través de una membrana semipermeable que separa moléculas basándose en su tamaño. La diálisis es usada para una amplia variedad de aplicaciones:
¿Desalado? , Efecto Buffer, eliminación de los reactivos de etiquetado, Estudiosvinculantes a las drogas, crecimiento y la alimentación celular, purificación de virus y de tratamiento de la sangre. Típicamente, una muestra y una solución buffer (llamado dializado) se colocan en lados opuestos de una membrana de diálisis que contiene poros de un tamaño de gama fabricado. Las muestras moleculares que son más Grades que los poros son retenidas en la muestra dentro de la membrana, perolas moléculas pequeñas pasan a través de la membrana, reduciendo la concentración de estas moléculas en la muestra (Figura 1). Alternativamente, Los compuestos deseados en solución buffer que estén en el exterior pueden ser llevados lentamente a la muestra.
Figura 1, Como trabaja la membrana de Diálisis. Una membrana de diálisis es una película semipermeable (generalmente una hoja de celulosaregenerada) que contiene varios poros de diferentes tamaños. Las moléculas más grandes que los poros no pueden pasar atreves de la membrana pero las moléculas pequeñas lo pueden hacer con libertad. De esta manera, la diálisis puede ser utilizada para llevar a cabo la purificación o intercambio buffer para muestras que contienen macromoléculas.
La característica de separación determinado por elporo en cuanto tamaño-rango de una membrana de diálisis se denomina con mayor frecuencia como el peso molecular de corte (MWCO) de la membrana.
El MWCO de una membrana se refiere a la masa molecular media más pequeña de una molécula estándar que no tendría difusión eficaz a través de la membrana. Típicamente, el tamaño macromolécula globular más pequeño (en Daltons) que es retenido por más de un90 % a la diálisis prolongada (durante la noche) define el MWCO nominal. Así, una membrana de diálisis con un 10K MWCO generalmente retendrá proteínas que tienen una masa molecular de al menos 10 kDa.
Es importante tener en cuenta que el MWCO de una membrana no es un valor claramente definido. La difusión de las moléculas cerca de el MWCO será más lento en comparación con las moléculasconsiderablemente más pequeñas que el MWCO. Y membranas de diálisis, que se componen de celulosa regenerada, contienen una amplia gama de tamaños de poro; A pesar de esto es prácticamente imposible lograr la retención del 100 %, incluso de moléculas muy grandes. Para garantizar el tiempo necesario para la eliminación de contaminantes en la aplicación de la diálisis, es necesaria la comprensión de laspropiedades de las membranas de diálisis y la influencia de otros factores, Tales como la relación de área de superficie - a - volumen de la muestra ( SA: V).
En este artículo, se caracterizan las propiedades de separación de membranas de diálisis que tienen calificaciones nominales MWCO de 2K, 3.5K, 7K, 10K y 20K. También comparamos las tasas de diálisis y otras especificaciones entre varios tamañosde Thermo Scientific Slide- A - Lyzer Devices y Thermo Scientific SnakeSkin Diálisis Tubing, que están diseñados para procesar las muestras de 0,1 ml a 250 ml.
Resultados y discusiones:
Para caracterizar y definir el MWCO y las propiedades de retención de nuestro 2K , 3.5K , 7K , 10K , 20K y las membranas de diálisis , se examinaron una serie de moléculas para determinar el porcentajeretenido en la muestra, después de la diálisis durante la noche en 3 ml de capacidad - Slide -A- Lyzer diálisis Cassettes (Figura 2 , paneles A a E).
Figura 2A. Retención con membrana de diálisis MWCO 2K.
Figura 2B. Retención con membrana de diálisis MWCO 3.5K
Figura 2C. Retención con membrana de diálisis MWCO 7K
Figura 2D. Retención con membrana de diálisis de 10K MWCO
Figura...
La diálisis es una técnica clásica de laboratorio que se basa en la difusión selectiva de moléculas a través de una membrana semipermeable que separa moléculas basándose en su tamaño. La diálisis es usada para una amplia variedad de aplicaciones:
¿Desalado? , Efecto Buffer, eliminación de los reactivos de etiquetado, Estudiosvinculantes a las drogas, crecimiento y la alimentación celular, purificación de virus y de tratamiento de la sangre. Típicamente, una muestra y una solución buffer (llamado dializado) se colocan en lados opuestos de una membrana de diálisis que contiene poros de un tamaño de gama fabricado. Las muestras moleculares que son más Grades que los poros son retenidas en la muestra dentro de la membrana, perolas moléculas pequeñas pasan a través de la membrana, reduciendo la concentración de estas moléculas en la muestra (Figura 1). Alternativamente, Los compuestos deseados en solución buffer que estén en el exterior pueden ser llevados lentamente a la muestra.
Figura 1, Como trabaja la membrana de Diálisis. Una membrana de diálisis es una película semipermeable (generalmente una hoja de celulosaregenerada) que contiene varios poros de diferentes tamaños. Las moléculas más grandes que los poros no pueden pasar atreves de la membrana pero las moléculas pequeñas lo pueden hacer con libertad. De esta manera, la diálisis puede ser utilizada para llevar a cabo la purificación o intercambio buffer para muestras que contienen macromoléculas.
La característica de separación determinado por elporo en cuanto tamaño-rango de una membrana de diálisis se denomina con mayor frecuencia como el peso molecular de corte (MWCO) de la membrana.
El MWCO de una membrana se refiere a la masa molecular media más pequeña de una molécula estándar que no tendría difusión eficaz a través de la membrana. Típicamente, el tamaño macromolécula globular más pequeño (en Daltons) que es retenido por más de un90 % a la diálisis prolongada (durante la noche) define el MWCO nominal. Así, una membrana de diálisis con un 10K MWCO generalmente retendrá proteínas que tienen una masa molecular de al menos 10 kDa.
Es importante tener en cuenta que el MWCO de una membrana no es un valor claramente definido. La difusión de las moléculas cerca de el MWCO será más lento en comparación con las moléculasconsiderablemente más pequeñas que el MWCO. Y membranas de diálisis, que se componen de celulosa regenerada, contienen una amplia gama de tamaños de poro; A pesar de esto es prácticamente imposible lograr la retención del 100 %, incluso de moléculas muy grandes. Para garantizar el tiempo necesario para la eliminación de contaminantes en la aplicación de la diálisis, es necesaria la comprensión de laspropiedades de las membranas de diálisis y la influencia de otros factores, Tales como la relación de área de superficie - a - volumen de la muestra ( SA: V).
En este artículo, se caracterizan las propiedades de separación de membranas de diálisis que tienen calificaciones nominales MWCO de 2K, 3.5K, 7K, 10K y 20K. También comparamos las tasas de diálisis y otras especificaciones entre varios tamañosde Thermo Scientific Slide- A - Lyzer Devices y Thermo Scientific SnakeSkin Diálisis Tubing, que están diseñados para procesar las muestras de 0,1 ml a 250 ml.
Resultados y discusiones:
Para caracterizar y definir el MWCO y las propiedades de retención de nuestro 2K , 3.5K , 7K , 10K , 20K y las membranas de diálisis , se examinaron una serie de moléculas para determinar el porcentajeretenido en la muestra, después de la diálisis durante la noche en 3 ml de capacidad - Slide -A- Lyzer diálisis Cassettes (Figura 2 , paneles A a E).
Figura 2A. Retención con membrana de diálisis MWCO 2K.
Figura 2B. Retención con membrana de diálisis MWCO 3.5K
Figura 2C. Retención con membrana de diálisis MWCO 7K
Figura 2D. Retención con membrana de diálisis de 10K MWCO
Figura...
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