Catalasa, Deshidrogenasa Lactica Y Actividad De Inhibidores
Páginas: 5 (1143 palabras)
Publicado: 14 de junio de 2012
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN ALIMENTOS
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II
PROFESOR: Ing. María Augusta Garcés P
AYUDANTE: Egda. Mayra Tobar
CURSO: 7mo. Semestre
TEMA: CATALASA, DESHIDROGENASA LACTICA Y ACTIVIDAD DE INHIBIDORES
INTRODUCCIÓN
Un inhibidor como su nombre indica es una sustancia que interfiere en la acción de la enzima y hace más lenta unareacción. Se puede obtener mucha información acerca de las reacciones enzimáticas observado los cambios causados por la presencia de inhibidores. Los inhibidores pueden afectar de dos formas a una reacción enzimática:
Un inhibidor reversible puede unirse a la enzima y después ser liberado dejando la enzima en su condición original.
Un inhibidor irreversible reacciona con la enzima para produciruna proteína que no tiene actividad enzimática a partir de la cual es imposible regenerar la enzima original.
Se puede distinguir dos clases principales de inhibidores reversibles con base al sitio de la enzima al que se unen: a) Una clase consiste en compuestos muy similares al sustrato en su estructura. En este caso el inhibidor puede unirse al sitio activo y bloquea el acceso del sustrato aeste sitio (inhibición competitiva) debido a que el inhibidor compite con el sustrato por el sitio activo de la enzima. b) Todos los inhibidores que se unen a la enzima en un sitio distinto del sitio activo y como resultado de tal unión alteran la estructura de la enzima, sobre todo en la región del sitio activo, el sustrato aún puede unirse al sitio activo pero la enzima no puede catalizar lareacción cuando está unida al inhibidor (inhibición no competitiva)
La catalasa (E.C. 1.11.1.6. Peróxido de hidrogeno: peróxido de hidrogeno oxidoreductasa) es una enzima con un grupo hemo, cuya función es la destrucción del peróxido de hidrogeno, producto de varias oxidaciones biológicas. La descomposición del peróxido de hidrogeno se puede considerar como la oxidación de una molécula por otra. Lareacción es:
2H2O2 + CATALASA O2 + 2 H2O.
El mecanismo de reacción es a través de la formación de un complejo catalasa – peróxido de hidrogeno. En los peroxisomas se encuentran grandes cantidades de catalasa. En estos orgánulos, se generan grandes cantidades de H2O2, por lo que es necesaria la acción de la catalasa para convertirlo en agua.
Lactato deshidrogenasa (E.C.1.1.1.28) Es una enzima que cataliza la reducción reversible del piruvato a lactato, utilizando la coenzima NADH como agente reductor. Esto la diferencia de otras formas fermentativas anaerobias del catabolismo de los carbohidratos. La forma enzimática más común tiene un peso molecular de 140,000 pero todas las de los vertebrados están formadas por tetrámeros, con cuatro sitios catalíticosindependientes de cada tetrámero.
CH3COCOO- + NADH + H+ CH3CH2OCOO- + NAD+
El lactato es el producto de la reacción, producida en condiciones anaerobias, difunde a través de la membrana plasmática para quedar en los alrededores como producto de desecho. El dolor ocasionado por la fatiga y el rigor de las fibras musculares se debe en gran parte a laacumulación de lactato en el musculo.
En el hígado, el lactado es reconvertido a piruvato gracias al lactato deshidrogenasa. Esta enzima es utilizada por los médicos para el diagnóstico y seguimiento de un infarto de miocardio
OBJETIVOS
Observar la reacción de la catalasa y lactato deshidrogenasa así como el efecto de algunos inhibidores como cianuro, nitrato de plomo o calentamiento a altastemperaturas.
MATERIALES:
Gradilla
Vaso de precipitados de 500 mL.
Vaso de precipitados de 250 mL.
4 pipetas de 5 mL.
9 tubos de ensaye de 15x150
Pinzas para tubo de ensayo
Mechero, tripie y tela de asbestos
Lanzetas estériles
Sangre
Reactivos
Peróxido de hidrógeno
Cianuro de Sodio
Nitrato de plomo
Azul de metileno
Lactato de sodio (puede ser grado alimenticio)
Levadura...
FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN ALIMENTOS
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II
PROFESOR: Ing. María Augusta Garcés P
AYUDANTE: Egda. Mayra Tobar
CURSO: 7mo. Semestre
TEMA: CATALASA, DESHIDROGENASA LACTICA Y ACTIVIDAD DE INHIBIDORES
INTRODUCCIÓN
Un inhibidor como su nombre indica es una sustancia que interfiere en la acción de la enzima y hace más lenta unareacción. Se puede obtener mucha información acerca de las reacciones enzimáticas observado los cambios causados por la presencia de inhibidores. Los inhibidores pueden afectar de dos formas a una reacción enzimática:
Un inhibidor reversible puede unirse a la enzima y después ser liberado dejando la enzima en su condición original.
Un inhibidor irreversible reacciona con la enzima para produciruna proteína que no tiene actividad enzimática a partir de la cual es imposible regenerar la enzima original.
Se puede distinguir dos clases principales de inhibidores reversibles con base al sitio de la enzima al que se unen: a) Una clase consiste en compuestos muy similares al sustrato en su estructura. En este caso el inhibidor puede unirse al sitio activo y bloquea el acceso del sustrato aeste sitio (inhibición competitiva) debido a que el inhibidor compite con el sustrato por el sitio activo de la enzima. b) Todos los inhibidores que se unen a la enzima en un sitio distinto del sitio activo y como resultado de tal unión alteran la estructura de la enzima, sobre todo en la región del sitio activo, el sustrato aún puede unirse al sitio activo pero la enzima no puede catalizar lareacción cuando está unida al inhibidor (inhibición no competitiva)
La catalasa (E.C. 1.11.1.6. Peróxido de hidrogeno: peróxido de hidrogeno oxidoreductasa) es una enzima con un grupo hemo, cuya función es la destrucción del peróxido de hidrogeno, producto de varias oxidaciones biológicas. La descomposición del peróxido de hidrogeno se puede considerar como la oxidación de una molécula por otra. Lareacción es:
2H2O2 + CATALASA O2 + 2 H2O.
El mecanismo de reacción es a través de la formación de un complejo catalasa – peróxido de hidrogeno. En los peroxisomas se encuentran grandes cantidades de catalasa. En estos orgánulos, se generan grandes cantidades de H2O2, por lo que es necesaria la acción de la catalasa para convertirlo en agua.
Lactato deshidrogenasa (E.C.1.1.1.28) Es una enzima que cataliza la reducción reversible del piruvato a lactato, utilizando la coenzima NADH como agente reductor. Esto la diferencia de otras formas fermentativas anaerobias del catabolismo de los carbohidratos. La forma enzimática más común tiene un peso molecular de 140,000 pero todas las de los vertebrados están formadas por tetrámeros, con cuatro sitios catalíticosindependientes de cada tetrámero.
CH3COCOO- + NADH + H+ CH3CH2OCOO- + NAD+
El lactato es el producto de la reacción, producida en condiciones anaerobias, difunde a través de la membrana plasmática para quedar en los alrededores como producto de desecho. El dolor ocasionado por la fatiga y el rigor de las fibras musculares se debe en gran parte a laacumulación de lactato en el musculo.
En el hígado, el lactado es reconvertido a piruvato gracias al lactato deshidrogenasa. Esta enzima es utilizada por los médicos para el diagnóstico y seguimiento de un infarto de miocardio
OBJETIVOS
Observar la reacción de la catalasa y lactato deshidrogenasa así como el efecto de algunos inhibidores como cianuro, nitrato de plomo o calentamiento a altastemperaturas.
MATERIALES:
Gradilla
Vaso de precipitados de 500 mL.
Vaso de precipitados de 250 mL.
4 pipetas de 5 mL.
9 tubos de ensaye de 15x150
Pinzas para tubo de ensayo
Mechero, tripie y tela de asbestos
Lanzetas estériles
Sangre
Reactivos
Peróxido de hidrógeno
Cianuro de Sodio
Nitrato de plomo
Azul de metileno
Lactato de sodio (puede ser grado alimenticio)
Levadura...
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