Cocos gram positivos

COCOS GRAM POSITIVOS: Aspectos prácticos
Verónica Seija TAXONOMIA - Breve reseña Antes de entrar de lleno en la identificación del género Staphylococcus realizaremos una breve introducción a la taxonomía de los cocos Gram positivos. Estos se pueden clasificar, en primera instancia, en cuanto a sus requerimientos atmosféricos. Así tenemos los cocos Gram positivos anaerobios estrictos constituidospor los géneros Peptococcus y Peptoestreptococcus, los cuales serán estudiados en el capítulo referido a bacterias anaerobias. Por otro lado tenemos los cocos Gram positivos aerobios y anaerobios facultativos que están constituidos por la familia Micrococacceae (géneros Staphylococcus, Micrococcus, Planococcus y Stomacoccus) y los géneros Streptococcus y Enterococcus. GENERO STAPHYLOCOCCUSIDENTIFICACION Durante el curso se le entregarán a los estudiantes distintas cepas de cocos Gram + para su identificación. El primer paso para la identificación de una especie bacteriana es el estudio de su morfología microscópica y macroscópica. Luego se deben estudiar sus requerimientos atmosféricos y nutricionales. Por último se procede a la realización de pruebas bioquímicas que permitirán llegar ala identificación de género y especie bacteriana. Morfología microscópica Para la misma se debe realizar un frotis, de preferencia a partir de medio líquido, realizando luego la tinción de Gram lo que nos permitirá apreciar la forma, agrupación y comportamiento al Gram de la cepa en estudio. El género Staphylococcus se caracteriza por ser cocos Gram positivos que se agrupan en forma de racimo.Morfología macroscópica Existe morfología macroscópica en medio líquido y en medio sólido. En medio líquido debemos observar la turbidez que se desarrolla luego de incubar 18-24 horas. En medio sólido debemos contar con un aislamiento de la cepa a estudiar en una placa de Petri. El aislamiento nos permitirá observar las características de las colonias, que son las estructuras macroscópicas que formanlas bacterias cuando crecen en medios sólidos. Requerimientos atmosféricos El género Staphylococcus es aerobio-anaerobio facultativo, por tanto su crecimiento en tioglicolato será en toda la extensión del tubo. Requerimientos nutricionales El género Staphylococcus es no exigente en cuanto a sus requerimientos nutricionales, por lo tanto crece en medios de cultivo pobres. ENSAYOS BIOQUIMICOS Laspruebas o ensayos bioquímicos son aquellas que ponen en evidencia la existencia de una enzima o pasos metabólicos determinados. Ahora enumeraremos las pruebas bioquímicas necesarias para la identificación de los estafilococos. 1. PRUEBA DE LA CATALASA Objetivo: Separar la Flia. Micrococacceae (catalasa +) de los Géneros Streptococcus y Enterococcus (catalasa -). Fundamento: La enzima catalasadescompone el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno bajo la fórmula 2 H2O2----2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, que es un producto final del metabolismo aerobio de los azúcares. Procedimiento: Se coloca una gota de H2O2 al 3% sobre un portaobjetos y luego se transfiere una porción de colonia sobre el H2O2 realizándose una emulsión. En lo posibledebe tomarse la colonia a partir de un medio sin sangre ya que los eritrocitos tienen actividad de catalasa y pueden falsear los resultados. Esta prueba también puede realizarse en un aislamiento en tubo, simplemente colocando unas gotas de H2O2 dentro del mismo. Interpretación de resultados: El desprendimiento de burbujas se considera una prueba positiva. Dentro de la Flia. Micrococacceae existen4 géneros, el de mayor importancia clínica es el Género Staphylococcus. Para diferenciarlo del Género Micrococcus se realizan distintas pruebas bioquímicas que sólo mencionaremos en la Tabla Nº 2. Dentro del G.Staphylococcus existen 3 especies de importancia clínica: S.aureus, S.saprophyticus y S.epidermidis. Estas se diferencias según las pruebas bioquímicas que se detallan en la Tabla Nº 3. 2....