coliformes guia

CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

EL ANALISIS POR NUMERO MAS PROBABLE (NMP)
La determinación de coliformes fecales en los alimentos se utiliza paradiferenciarlos de otros grupos coliformes que tienen otros orígenes. Los fecales son indicadores del contacto del alimento con materia fecal.
La determinación de microorganismos coliformes totalespor el método del número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a 35°C ± 1°C durante 48 h.,utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase Confirmativa.
La técnica de fermentación en tubos múltiples, los resultadosdel estudio de los tubos y diluciones replicados se comunican en términos de Numero Más Probable (NMP) de microorganismos existentes.

PRUEBA PRESUNTIVA
Consiste en una metodología de tipogeneral para cualquier grupo de bacterias.
PRUEBA CONFIRMATIVA
La prueba confirmativa es específica.

1. OBJETIVOS

Comprobar por método de NMP el grupo coliformes totales en muestras de alimentos.Diferenciar los organismos coliformes totales de los microorganismos coliformes fecales y en informe reportar resultados.



EQUIPOS

• Autoclave
• Horno para esterilizar material de vidrio a160-180°C
• Incubadora a 35° ± 2,0ºC

MATERIALES:
Muestra: cualquier alimento
Caldo EC
Caldo Lauril Triptosa (CLT).
Caldo Mc. Conkey.
Caldo lactosa.
Medio bilis lactosa (BLVB
PipetasMedio EC
Mechero Bunsen
Gradillas

Prueba de coliformes (NMP)
1. Prueba presuntiva
• (CLT).
• Caldo Mc. Conkey.
• Caldo lactosa. (Es un medio rico en nutrientes, y no contiene inhibidores delcrecimiento bacteriano.)
• Medio EC. (El contenido de lactosa en este medio, favorece el crecimiento de bacterias lactosa positiva)
2. Prueba confirmativa:
• Medio EC.
• Medio bilis lactosa (BLVB)...