Comparación De Produccion De Pectinasas Por Aspergillus Niger Comparando Tres Fuentes De Carbono

Comparación de la producción de pectinasas por Aspergillus niger utilizando tres fuentes de carbono diferentes.

Introducción:
La pectina es una mezcla amplia de sustancias pécticas de diferente composición que contiene como componente principal ácido pectínico, se encuentra localizada en la pared celular de las dicotiledóneas y algunas plantas monocotiledóneas (Hoff y Castro, 1969; Jarvis1988) y puede estar entrecruzada con otros polisacáridos estructurales y proteínas para formar protopectina insoluble.
Las pectinas están formadas principalmente de una cadena de residuos de ácido D-galacturónico unidos mediante enlaces α 1- 4. Estos residuos pueden estar parcialmente metilados o esterificados en el C-6 con alcohol metílico, siendo el grado de metilación variable según el origende la pectina.
Las pectinas son degradadas por un conjunto de enzimas pectinasas las cuales presentan gran diversidad, debida en parte a la compleja naturaleza del sustrato degradado.
Las pectinasas se clasifican en tres tipos principales:
* Enzimas desesterificantes (pectinesterasas), catalizan la desesterificación de los grupos
metilo de la pectina dando lugar a ácido poligalacturónicoo pectato (Kashyap et. al.,
2001).
* Enzimas despolimerizantes (hidrolasas y liasas) Los enzimas despolimerizantes pueden romper los enlaces α(1-4) glucosídicos entre los monómeros de ácido galacturónico de las pectinas por adición de agua o por transeliminación, las cuales pueden actuar de modo endo o exo.
* Protopectinasas son enzimas que solubilizan la protopectina. Se clasifican
endos tipos (Sakai et al., 1993). El tipo A degrada el ácido poligalacturónico de la
protopectina mientras que el tipo B degrada las cadenas de polisacáridos que conectan
el ácido poligalacturónico con otros constituyentes de la pared celular. (Alkota et. al.,1998)

Las pectinasas se usan en la industria alimentaria para obtener y clarificar jugos de fruta y vino, por lo que tienen mercadopotencial, dando como resultado un desarrollo de sistemas para su producción a escala industrial. El método usual de producción de las pectinasas es por fermentación sumergida (FML), en el que se utilizan medios de cultivo sintéticos y basados en sustratos naturales, con una alta concentración de pectina. Las plantas y los microorganismos son los principales productores de estos enzimas (Naidu yPanda, 1998). Entre los que se encuentra el hongo filamentoso Aspergillus niger comúnmente llamados mohos negros. Estos hongos son capaces de utilizar una gran variedad de sustancias para alimentarse gracias al elevado número de enzimas que producen, entre ellas las pectinasas.

Objetivo general:
* Comparar la producción de pectinasas por Aspergillus niger usando tres fuentes de carbonodiferentes.
Objetivos particulares:
* Realizar tres fermentaciones sumergidas cada una con una fuente de carbono distinta.
* Determinar la cantidad de proteínas totales por el método de Lowry.
* Determinar la cinética de producción de pectinasas.
* Cuantificar la producción de biomasa al final de la fermentación por usando el método de peso seco.
* Determinar algunos parámetros de lacinética de fermentación como velocidad específica de crecimiento, tiempo de duplicación y productividad.
Hipótesis:
* La producción de pectinasas por Aspergillus niger en el medio con extracto de toronja será mayor que la del medio con extracto de plátano.
* La producción de pectinasas por Aspergillus niger en el medio con pectina comercial será mayor que la de los medios con extractode toronja y plátano respectivamente.
Metodología:
1. Preparación del inoculo.

* La cepa de origen de Aspergillus niger se germina en Agar Sabouraud sembrando al microorganismo por picadura en 4 cajas Petri estériles con un asa flameada. Se incuba 3 días a 30°C.
* Luego de este período se lavan cada uno de los cuatro subcultivos de la cepa de origen con 25ml del de agua destilada...