CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN EN CAPA FINA (ccf)

CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN EN CAPA FINA (ccf)
OBJETIVO
Separar e identificar los componentes de una mezcla, así como conocer el grado de pureza de la misma utilizando la técnica de cromatografíade adsorción en capa fina.

MATERIALES
4 placas de adsorción de sílicagel(gel de sílice), de aproximadamente 65x40(mm)
1 Lápiz de grafito
1 Vaso de precipitados de 100 mL
1 Gradilla porta tubos10 Tubos Eppendorf
10 Tubos capilares finos.

PROCEDIMIENTO
En las placas de adsorción de ccf se marca una línea horizontal a una distancia aproximada de 1 cm del borde inferior, ésta será lalínea de origen donde se colorará la muestra correspondiente, señaladas e identificadas por un punto y un número. Todas las marcas de las placas se realizan con el lápiz.
Se realizan un total de 4cromatografías, como a continuación se detallan:
1ª Cromatografía
Disolvente: Metanol(CH3OH)
Eluyente: Mezcla de Diclorometano - Metanol(Cl2CH2:CH3OH, 20:1)

Compuestos a analizar:
(1)p-Nitroanilina
(2) Acetanilida
En un tubo Eppendorf se diluye una mínima cantidad de p-Nitroanilina con Metanol; la disolución debe estar muy diluida. De igual modo se prepara otra disolución en unsegundo tubo eppendorf con Acetanilida.
Con ayuda de un capilar con punta fina se recoge una muestra de cada disolución del sobrenadante del tubo Eppendorf correspondiente y se coloca sobre cada puntoen la línea de origen, equidistantes e identificándolos como (1) y (2).
La placa se introduce en el vaso de precipitado de 100 mL, que ya contiene el eluyente citado en cantidad suficiente que noalcance la altura de la línea de origen determinada en la placa de ccf, se tapa el mismo y se espera hasta que el frente del eluyente alcance el borde superior a una distancia de 1cm aproximadamente. Enese momento se saca la placa y se marca la línea de este frente(frente de la fase móvil: eluyente).
La placa seca y se expone a luz ultravioleta, donde se observan a distintas alturas dos puntos...