Cromatografia En Papel

Universidad |
PRÁCTICA 5 CROMATOGRÍA EN PAPEL |
Practice 5 Paper Chromatography |
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30/06/2011 |

El uso de la Cromatografía como técnica de separación, permite el análisis de mezclas complejas de compuestos muy estrechamente relacionados químicamente (aminoácidos). Además de identificar mediante una muestra conocida una muestra problema. Es de suma importancia para elmanejo de aislamiento de proteínas. |



INTRODUCCIÓN:
La palabra cromatografía proviene de kromatos, color y graphos, escrito. Los primeros registros acerca de la Cromatografía son de 1939 por Brown, que fue el primero que usó la cromatografía circular en papel. Después en 1944 Consden, Gordon, y Martin, describieron la cromatografía de partición en papel. En 1906, el botánico ruso MikhailTswett (1872-1919) formalizó el uso de la cromatografía en estudios científicos, aplicándola a la separación de los pigmentos naturales que se encuentran en las plantas (conocidos como carotenoides y clorofilas). Además le dio ese nombre a la técnica. Tswett empacó una columna de vidrio vertical (de unos cuantos centímetros de diámetro) con material adsorbente. Luego, por la columna vertical virtióuna solución que contenía la mezcla de pigmentos provenientes de las hojas molidas de una planta. Pasados unos minutos, el material empacado en la columna había adquirido una coloración diferente por segmentos. Es decir, había logrado la separación de los pigmentos naturales de la planta. En cada segmento de color definido había un pigmento diferente.
La cromatografía en papel es la técnica deseparación e identificación de sustancias químicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de papel de filtro. Se toma una pieza de papel de filtro y cerca de uno de sus extremos se deposita una gota de la solución que contiene la mezcla de las sustancias que se quieren separas. Se deja secar la gota y quedara la mancha de las sustancias mezcladas. El extremo del papel mas próximo ala mancha se introduce en un disolvente apropiado, pero sin que la mancha llegue a introducirse en él. Existen muchos tipos de cromatografía sobre papel, una primera división de las variadas clases podría ser:
1- Cromatografía ascendente: el disolvente se encuentra en el fondo del recipiente que sostiene al papel y va subiendo a través de el por capilaridad.
2- Cromatografía descendente: eldisolvente esta en un recipiente esta en un recipiente del que cuelga el papel, fluye por él hacia abajo por una combinación de capilaridad y gravedad.

Al final del proceso los componentes separados emergen en orden creciente de interacción con la fase estacionaria al último. El reparto entre las fases aprovecha las diferencias entre las propiedades físicas y/o químicas de los componentes dela muestra. Los componentes adyacentes (picos) se separan cuando el pico que sale después es retardado lo suficiente para impedir la sobreposición con el pico que emergió antes.
Una amplia gama de selección de materiales para las fases móvil y estacionaria, permite separar moléculas que difieren muy poco en sus propiedades físicas y químicas. En un sentido amplio, la distribución de un solutoentre dos fases es el resultado del balance de fuerzas entre las moléculas del soluto y las moléculas de cada fase. Refleja la atracción o repulsión relativas que presentan las moléculas o iones de las fases competidoras por el soluto y entre sí. Estas fuerzas pueden ser de naturaleza polar, proviniendo de momentos dipolares permanentes o inducidos, o pueden deberse a fuerzas de dispersión de tipoLondon.
La resultante de las fuerzas: Cuando el disolvente avanza sobre las manchas de las sustancias, comienzan a actuar dos tipos de fuerzas opuestas: unas que arrastran y otras que retardan. Las fuerzas propulsoras actúan apartando las sustancias de su punto de origen y desplazándolas en dirección del flujo de origen. Las fuerzas retardantes tratan de impedir el movimiento de las sustancias,...