cromatografía


Resumen

Mediante la observación de muestras con distintos tipos de mezclas previamente preparadas para la cromatografía en capa fina, se escogió la mezcla más conveniente en la separación de compuestos para los pigmentos de chile guajillo. Teniendo la mezcla a utilizar, se procede a preparar la fase estacionaria que consiste en sílica gel con acetato de etilo, se siembra la muestra yposteriormente se hace pasar la fase móvil a través de la columna, se van separando distintas muestras cada 3 ml en distintos recipientes.
Una vez obtenidas las muestras, se concentran y se procede a preparar placas para la realización de la cromatografía en capa fina, haciendo una comparación de las nuevas muestras, con las del pigmento originalmente obtenido.
Introducción
Frecuentemente, las mezclas desustancias orgánicas se separan, adsorbiendo el material disuelto en un pequeño volumen de disolvente, sobre una columna de alúmina, eluyendo la columna con una sucesión de disolventes de poder eluyente creciente, es decir, con capacidad creciente para desalojar las sustancias adsorbidas. El eluyente se recoge en fracciones numeradas, cada una de las cuales se evapora para examinar el residuo. Silos componentes de la muestra son de tipos químicos diferentes, algunos se eluyen al principio del proceso y otros en las fracciones medias o finales.

Objetivos

Separación de los pigmentos obtenidos del chile guajillo por medio de una cromatografía en columna.

Marco teórico

La cromatografía es un método físico de separación basado en la diferencia de distribución de los componentes de unamezcla entre dos fases inmiscibles, una móvil y otra estacionaria. Las moléculas de soluto de la mezcla son retenidas por la fase estacionaria y arrastradas por la fase móvil, de manera que si los componentes de la mezcla presentan diferentes afinidades por alguna de las fases, sus velocidades medias de avance a lo largo del sistema serán diferentes. La afinidad viene determinada por fuerzas de tipoVan der Waals, puentes de hidrógeno o transferencia de carga. Los componentes que sean fuertemente retenidos por la fase estacionaria se moverán más lentamente a lo largo de dicha fase que aquellos que se unen débilmente. Como consecuencia de esta diferencia de movilidad los componentes de la mezcla se separan en bandas discretas, que pueden analizarse cualitativa o cuantitativamente mediante el usode los detectores adecuados.

La cromatografía es una técnica extremadamente versátil, que permite tanto la separación de mezclas como la purificación de productos, la determinación del grado de pureza de un compuesto, el seguimiento de reacciones o la detección y caracterización de compuestos. Su principal ventaja frente a otros métodos de separación y purificación consiste en que ésta técnicapuede aplicarse a cantidades muy pequeñas de producto.

La fase estacionaria consiste en un sólido adsorbente empaquetado en una columna de vidrio. La mezcla a separar (muestra) se deposita sobre la superficie superior de la fase estacionaria quedando adsorbida en ella. A continuación, se permite el paso de la fase móvil (eluyente) a lo largo de la columna a través de la fase estacionaria. Duranteel proceso cromatográfico los componentes de la muestra son arrastrados por la fase móvil a distintas velocidades efectuándose la separación. La velocidad de arrastre de cada componente depende de su grado de adsorción en la fase estacionaria y de su afinidad por la fase móvil.

Para que la separación de los componentes de la mezcla sea efectiva, su velocidad de migración a lo largo de la columnadebe ser suficientemente diferente y la longitud de la columna adecuada. Algunos adsorbentes comúnmente utilizados son: gel de sílice, alúmina, sacarosa y almidón. La fase móvil consiste en un disolvente o mezcla de disolventes, seleccionado en base a su polaridad con el fin de optimizar la separación de los componentes de la muestra en la columna. De forma orientativa se puede establecer el...