cuestenario de proteinas


Laboratorio de Bioquímica

Profesor:
Abril Graciano Verdugo

Practica 3
Reacciones de color para identificación de aminoácidos

Equipo
Bustamante Palomares Gabriela Evangelina
Valenzuela Islas Iván Alejandro

Fecha
16/10/2013
Introducción
Entre las múltiples funciones que desarrollan los aminoácidos en las células vivas, está la de servir como las unidades o monómeros a partirde los cuales se construyen las cadenas polipeptidicas de proteínas.

Las clases de aminoácidos, el orden en el cual se reúnen entre sí, y sus interacciones espaciales establecen las estructuras tridimensionales y las propiedades biológicas de las proteínas sencillas. También son los determinantes principales de la estructura y función de las proteínas complejas que contienen, además de losaminoácidos el grupo hem, carbohidratos, lípidos, ácidos nucleicos, etc.

Las proteínas son un grupo de sustancias de gran importancia para funciones biológicas muy diversas. Al grupo de las proteínas, pertenecen las enzimas o catalizadores biológicos, algunos transportadores como las lipoproteínas y la hemoglobina, los compuestos estructurales y de contracción como son los que forman parte de losmúsculos, las moléculas de reconocimiento celular del tipo de las inmunoglobulinas, algunas hormonas como insulina, etc. Toda esta variedad de funciones es posible por la gran diversidad estructural que existe en las proteínas.

Objetivo
El alumno debe tener claro la configuración L o D de los aminoácidos. Las reacciones de los grupos amino y carboxilo de los aminoácidos y las reaccionesespecíficas para los grupos de las cadenas laterales de los aminoácidos.
Fundamento de las reacciones

Reacción de Ninhidrina: La ninhidrina es un agente oxidante poderoso y lleva a cabo la deaminación oxidativa de los grupos α-amino, liberando amoniaco, bióxido de carbono y el correspondiente aldehído, así como la forma reducida de la ninhidrina. El amoniaco entonces, reacciona con un mol adicional deninhidrina oxidada y un mol de ninhidrina reducida para dar una sustancia de color azul violeta, que presenta un máximo de absorción a 570 nanómetros. Esta reacción sirve para estimar cuantitativamente las aminas primarias, y si no hay compuestos que interfieran, también sirve para determinar cuantitativamente a los aminoácidos.

Reacción de Millon: Esta reacción también llamada de Hofmann, esespecífica para determinar tirosina. De hecho lo que se determina son los grupos hidroxifenilos que puedan nitrarse fácilmente. El color rojo que se forma al reaccionar la tirosina con el reactivo, se cree que se debe a un complejo mercúrico con los derivados nitrofenol. Cuando se añade el reactivo a una solución proteica, se forma primero un precipitado blanco, que corresponde a la proteínacoagulada por el calor, pero si la proteína contenía tirosina, ese coagulo se pondrá de color rosa rojo, al prolongar un poco al calentamiento.

Reacción Xantoproteica: La reacción es debida a la nitración del anillo bencénico con el ácido nítrico concentrado, para dar productos de color amarillo, que se tornan anaranjados al añadir álcali, debido a la formación de sales. En las condiciones delexperimento solo la tirosina y el triptófano darán positiva la prueba. Si se prueba una solución de proteína que contenga tirosina o triptófano, se formara primero un precipitado blanco al añadir el nítrico concentrado.


Materiales y Métodos

Gradilla
20 tubos de ensaye de 18 x 150
1 vaso de precipitados de 600 ml.
1 vaso de precipitados de 250 ml.
7 vasos de precipitados de 50 ml.
2 pipetasde 5 ml.
3 pipetas de 1 ml.
2 pinzas para tubos de ensaye
Mechero
Tripie
Tela de asbesto
Escobetilla


Procedimiento

Reacción de la ninhidrina:
1. Con su mechero, tripie, tela de asbesto y el vaso de precipitados de 250 ml se preparo un baño de agua hirviendo. No llene de agua totalmente el vaso de precipitados, sino más o menos a la mitad. Use agua destilada.
2. Con “masking...