Cultivo De Cepas

Siembra y cultivo de cepas

Trabajo encargado

Microbiología ambiental (Laboratorio)

Marco Antonio Chambilla Llerena

Tercero “A”

Blgo. Pierina Gamero-Andrade Sandoval

Juliaca 2012-06-10

Objetivos:

1: Proporcionar el medio para que el alumno trabaje en condiciones de esterilidad

2: Manejar el material que se empleara en la siembra o inoculación de cepas

3: Explicarlos diferentes tipos de siembra que se pueda realizar

Introducción:

Definición teórica y el punto de vista de los objetivos del alumno

1: El alumno encargado debe trabajar en condiciones de esterilidad por la razón de que si el medio de trabajo está contaminado alterara completamente la muestra y fracasara en el cultivo por eso es mejor esterilizar antes de trabajar, no solo elambiente sino los objetos de trabajo

2: El alumno aprenderá a manejar o manipular los objetos de siembra en el mundo microbiano para eso debe estar precavido de todo antes de trabajar por eso se recomienda:
* Trabajar en un medio estéril
* Tener conocimientos previos
* Haberse preparado teóricamente antes para acceder a la practica

3: Explicar los diferentes métodos de siembra ya que nosiempre se trabaja con un solo modelo porque existe el riego de arruinar un trabajo si no se trabaja con los materiales y métodos correspondientes a cada tipo de siembra

Materiales
Para preparar los medios:

Placas petri esterilizadas
Caldo
Mechero

Para realizar prepraciones
Porta
Cubre
Agua
Glicerina
Mechero
Agar
Balanza

Métodos:
Los métodos de vertido en placa yextensión en placa

(a) Hacer diluciones seriadas de la suspensión bacteriana hasta obtener una muestra con sólo unos pocoscientos de bacterias

(b) verter la muestra en un tubo con agar a sobrefusión, mezclar y verter el contenido en una placa Petri.
(c) Después de la incubación, se desarrollan colonias en el agar (más pequeñas) y en su superficie (másgrandes).

Método de aislamiento porsiembra por estría en placa:
:
(a) Esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama de un mechero

(b) Introducirla en la suspensión bacteriana para recoger una muestra

(d) Sembrar haciendo estrías sobre la superficie de un medio sólido en una placa Petri,

(e) Volver a esterilizar el asa, tocar en la zona de la placa ya sembrada y hacer un segundo grupo de estríasenuna región nueva de la placa. Repetir el proceso una tercera y una cuarta vez, hasta conseguir que los grupos decélulas se diluyan y se separen células aisladas.

(c) Después de la incubación, se desarrollan colonias aisladas. Para estar seguro de que el cultivo es puro,repetir el proceso entero; para ello tomar una colonia aislada y sembrar por estrías una segunda placa.

Tipos de asa desiembra:

Las asas para inocular, son de diferentes tipos, pueden haber de mango plástico o de metal, como un pincel, de ahí parte una pinta más delgada de metal y al final tiene una especie de aro, muy pequeñito.

Preparación de inoculación

Métodos:

Por Estría Cruzada:
Lo que se hace tomo un inoculo con el asa y en un solo extremo de la placa empiezas hacer varias "rayas" o estrias sinseparar el asa, y sin volver a pasar por el lugar ya inoculado, posteriormente flameas el asa hasta que de un color rojo incandescente, enfrias la asa en un extremo del agar, posteriormente del ultimo extremo de la anterior estria, vuelves hacer "rayas" o estrias, repitiendo èsto hasta que formes en la placa en los costados una formaciòn de 4 estrias, para que al ultimo hagas una forma de S enmedio de la placa, evitando que toque las demas estrias ya realizadas.

Difusión:
El inoculo lo viertes sobre la placa de agar ya solidificado, y lo unico que haces es esparcirlo sobre toda la superficie del agar, lo puedes hacer con ayuda de una varillada de vidrio acodada, ésta la flameas antes de ponerla en contacto con el medio.

Placa Vaciada:
El inoculo se mezcla con el agar, a una...