Demostracion De La Actividad Encimatica

PRACTICA Nº 05: Demostración de la actividad enzimática
FUNDAMENTO TEORICO
Las enzimas son proteínas específicas que poseen función catalítica, mediante ellas se realizan numerosos procesos bioquímicos del metabolismo celular e influyendo en la velocidad de las reacciones metabólicas, las enzimas son capaces de regular efectivamente los procesos de vitalidad. Semejantemente a los catalizadoresinorgánicos, las enzimas aumentan la velocidad de las reacciones químicas a cuenta de la disminución de la energía de activación. Sin embargo, los catalizadores biológicos poseen una eficiencia mayor en la disminución de la energía de activación y, como regla general, desempeñan su función a una temperatura moderada, presión baja y unos valores de pH cercanos al neutro. Al mismo tiempo, lasenzimas son sensibles a las variaciones de las condiciones del medio en que están funcionando y tienen una serie de particularidades relacionadas a su naturaleza proteínica.
Las particularidades características de las enzimas, su especificidad, sensibilidad al cambio de la temperatura y el pH del medio así como también a la presencia de los activadores e inhibidores, son condicionadas por lanaturaleza proteínica de los catalizadores biológicos.
La temperatura del medio influye mucho en la actividad de las enzimas. La temperatura óptima para la acción de enzimas es la temperatura del cuerpo de los animales que oscila en el intervalo de 36 a 41 °C. Con cierto aumento de la temperatura del medio ocurre aceleración de la reacción a consecuencia de la activación de las moléculas de sustrato. Ala vez, incluso un aumento pequeño de la temperatura conduce al debilitamiento de los enlaces que mantienen la conformación de la molécula de la enzima, necesaria para la manifestación de su actividad catalítica. Empieza, gradualmente, la desnaturalización de la enzima que se acelera bruscamente a la temperatura que sobrepase 50°C.
La inactivación de la enzima con aumento de la temperatura delmedio es irreversible. Al bajar la temperatura la enzima disminuye su actividad también. El mecanismo de este proceso no está claro. Sin embargo, el enfriamiento no causa desnaturalización de la enzima y por lo tanto su inactivación puede ser reversible, sin embargo cualquier influencia exterior que altera la conformación nativa de la molécula proteínica conduce a la inactivación de la enzima.Objetivos:

* Reconocer la presencia de la catalasa en diferentes muestras biológicas (tejidos animales y vegetales) utilizando H2O2.
* Reconocer los principales factores que influyen modificando la actividad enzimática.
* Reconocer la acción hidrolítica de la amilasa o ptialina frente a los carbohidratos.
* Reconocer algunas propiedades específicas y catalíticas de las enzimas.Materiales:
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* Gradilla
* Tubos de ensayo
* Pipetas
* Agua oxigenada
* Solución de Lugol
* Baño María
* Pinzas
* Reactivo Felhing A y Felhing B
* Solución de sacarosa
* Mechero de alcohol
* Carne , hígado, papa, fríjol
* Solución de almidón al 1.5%
* Hielo
* NaOH al 20 %
* Bisturí
* HCl 1N
* Vinagre
*Vaso de precipitado
* Pipetas
* Cronómetro

1. Reconocimiento de la catalasa
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta enzima, la catalasa, lodescompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema. La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

Catalasa
2H2O2 2H2O + O2 (Reacción A)

La existencia de catalasa en los tejidos animales se aprovecha para utilizar el agua oxigenada como desinfectante, cuando se echa sobre una herida. Como muchas de las bacterias patógenas son...