Detección de la deleción F508 del gen CFTR por la técnica de mutagénesis dirigida mediante PCR en pacientes con Enfermedad Fibroquística

30/1/2014

Pediatría (Asunción) - Detección de la deleción F508 del gen CFTR por la técnica de mutagénesis dirigida mediante PCR en pacientes con Enferme…

Pediatría (Asunción)
ISSN 1683-9803 versión on-line

Pediatr. (Asunción) v.39 n.1 Asunción abr. 2012
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ARTÍCULO ORIGINAL

Detección de la deleción F508 del genCFTR por la técnica de
mutagénesis dirigida mediante PCR en pacientes con
Enfermedad Fibroquística
Detection of F508 Deletion in the CFTR Gene by PCR Directed
Mutagenesis in Patients with Fibrocystic Disease

Marta Ascurra(1), María Celeste Vega-Gómez(2), José L. San-Millán(3), Dolores
Tellería(3), Andrés Mojoli Le Quesne(2), María José Fernández-Nestosa(4)
1. Programa de Prevención de laFibrosis Quística y del Retardo Mental del Ministerio de Salud
Pública y Bienestar Social. Asunción, Paraguay.
2. Centro para el Desarrollo de la Investigación Científica (CEDIC). Asunción, Paraguay.
3. Unidad de Genética Molecular, Hospital Universitario Ramón y Cajal, e Instituto Ramón y
Cajal de Investigación Sanitaria (IRYCIS), Madrid, España.
4. Facultad Politécnica. Universidad Nacional deAsunción (FP-UNA). San Lorenzo, Paraguay.
Correspondencia: María José Fernández-Nestosa. Laboratorio de Computación Científica y
Aplicada (LCCA). FP-UNA. Campus Universitario UNA, San Lorenzo, Paraguay. E-mail:
mjfernandez@pol.una.py
Recibido: 24/02/2012, aceptado para publicación: 29/03/2012.

RESUMEN
La Fibrosis quística es la enfermedad autosómica recesiva más común en la poblaciónblanca
http://scielo.iics.una.py/scielo.php?pid=S1683-98032012000100005&script=sci_arttext&tlng=es

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y se caracteriza por la obstrucción de conductos, principalmente en pulmón, páncreas y
tracto genital. Se presenta en uno de cada2000 a 2500 nacidos vivos y tiene una frecuencia
de portadores de uno cada 20 a 25 nacidos vivos. La enfermedad es causada por diferentes
mutaciones en el gen regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
(CFTR). La mutación más frecuente en el gen CFTR es la deleción de tres pares de bases
(CTT) denominada F508. Este trabajo se realizó con el fin de estandarizar la técnicade
mutagénesis dirigida mediante PCR (PSM) para la detección de.la mutación F508 en pacientes
con fibrosis quística. El método utilizado fue validado mediante secuenciación del DNA del
exón 10 en todos los individuos. Mediante este análisis genético se detectaron seis individuos
con las mutaciones F508 e I507. El método implementado en nuestro laboratorio podría servir
para realizar un sondeopoblacional de portadores de mutaciones para la FQ.
Palabras clave: Fibrosis quística, F508, PSM, sitio de restricción.

ABSTRACT
Cystic fibrosis is the most common autosomal recessive disease in the Caucasian population
and is characterized by obstruction of passages, especially of the lungs, pancreas, and
genital tract. It presents in 1 of every 2000 to 2500 live births, and 1 of every 20to
25 newborns are carriers. The disease is caused by different mutations of the cystic fibrosis
transmembrane conductance regulator (CFTR) gene. The most common mutation in the CFTR
gene is the deletion of three base pairs (CTT) known as F508.Our study was performed for
the purpose of standardizing PCR-mediated site-directed mutagenesis (PSM) for detection of
the F508 mutation in patientswith cystic fibrosis. The method used was validated by DNA
sequencing of exon 10 in all individuals. This genetic analysis detected 6 persons with F508
and I507 mutations. The method used in our laboratory could be useful for carrying out a
population survey for carriers of the mutations for cystic fibrosis.
Keywords: Cystic fibrosis, F508, PSM, restriction site.

INTRODUCCIÓN
La fibrosis...