determinacion aminoacidos

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE AMINOÁCIDOS EN PRESENCIA DE FORMALDEHÍDO

Determinación de la aminoaciduria global

OBJETIVO:

El principal objetivo de esta práctica será la determinación deaminoácidos en presencia de formaldehído, es decir, la cantidad de nitrógeno aminoamoniacal de una muestra. La realizaremos por el método de Sörensen que valora en bloque el nitrógeno aminoamoniacal. (20%de nitrógeno amínico y 80% de nitrógeno amoniacal)

FUNDAMENTOS:

Emplearemos una característica propia de los aminoácidos: su capacidad bipolar.
Los aminoácidos, en función del pH del medio enel que se encuentren, y de acuerdo con los pKas característicos de cada grupo funcional, irán hidrolizándose, es decir soltando H+ al medio. De este modo, el aminoácido podrá encontrarse en 3 estados:a) Catiónico: todos los grupos reducidos ( -COOH y -NH3+); aa+

b) Neutro: hidrolizado el primer grupo funcional carboxilo (-COOH- y –NH3+); aa±

c) Aniónico: hidrolizados ambos grupos (-COOH-y NH2)

TÉCNICA DE TRABAJO:

1. Preparamos una solución de hidróxido sódico aproximadamente 0,1N. Para ello pesamos 4 g de NaOH y lo añadimos a un volumen de 1L, obteniendo así la disolución. NaOHes higroscópica, es decir, capta moléculas de agua.

2. Preparamos la valoración problema (2x):
- Cogemos con pipeta 20 ml de la solución de Gly y la introducimos en un Erlenmeyer.
- Le añadimos3 gotas de fenoftaleína
- Neutralizamos con solución de hidróxido sódico (sosa) introducida en una bureta, hasta el comienzo de viraje del indicador, es decir, hasta que observemos una levetonalidad rosácea.
- Añadimos 10 ml de formaldehído (baja el pH) con pipeta al Erlenmeyer.
- Titulamos la solución valorada de sosa hasta el viraje del indicador. El volumen de hidróxido sódico consumido enlas dos ocasiones realizadas son: 9,5 ml y 9 ml.

3. Preparamos la valoración testigo:
- Tomamos 20 ml de H20 destilada, hervida y enfriada al abrigo del aire.
- Añadimos 10 de formol
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