Determinación Cualitativa De Aminoácidos
Páginas: 16 (3875 palabras)
Publicado: 28 de julio de 2011
Identificación Cualitativa de Aminoácidos y sus Grupos Funcionales mediante Cromatografía en papel y Formaciòn de Compuestos Coloreados.
Campo, Yolima; González, Julio Cesar; Mosquera, Tatiana; Piedrahita Mauricio.
yoli_campo@yahoo.com; jucegonpo@hotmail.com; tatichevere@hotmail.com; maopc12@hotmail.com.
Facultad de Ciencias Básicas. Laboratorio de Bioquímica, Universidad Santiago deCali, Cali, COLOMBIA.
RESUMEN
Se realizó la separación de una mezcla de aminoácidos mediante cromatografía en papel utilizando los aminoácidos patrón leucina, alanina y acido aspártico y como fácil móvil un solvente con carácter apolar. Se reveló el cromatograma mediante la reacción con ninhidrina y finalmente se identificaron los aminoácidos en la mezcla por comparación con la posición desus correspondientes patrones que expusieron diferentes grados de retención en la fase estacionaria. Los resultados del Rf para los aminoácidos se registraron como 0.67 para la leucina, 0.47 para la alanina y 0.17 para el acido aspártico; el grupo R de cada uno de los aminoácidos fue el factor determinante de la distribución de estos compuestos en el cromatograma.
En la segunda fase de lapráctica, se emplearon reacciones de los aminoácidos con diferentes reactivos para su identificación y presencia de grupos funcionales característicos. En la identificación de aminoácidos todos revelaron compuestos violeta-purpura con la ninhidrina, a excepción de la prolina cuyo viraje fue naranja-amarillo; la prueba fue positiva para todos los aminoácidos.
La reacción xantoproteica resultópositiva para la tirosina y el triptófano con grupos bencénicos, la reacción del nitroprusiato de sodio se confirmó positiva para la cisteína con el grupo SH y la reacción del triptófano con acido glioxilico reveló la presencia de un anillo.
INTRODUCCIÓN
Los aminoácidos son moléculas orgánicas pequeñas que son única fuente aprovechable de nitrógeno para el ser humano y que además son unidadesfundamentales para la síntesis de las proteínas, y precursores de otros compuestos nitrogenados. De esta manera se pueden clasificar como esenciales y no esenciales.
Los aminoácidos esenciales son aquellos que no pueden ser sintetizados en el organismo, y por esa razón deben incorporarse en la dieta mediante ingesta. En esta clasificación se encuentran los aminoácidos histidina,isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano y valina.
En contaste los aminoácidos no esenciales son aquellos que son sintetizados en el organismo. La alanina, arginina, asparagina, cisteina, cistina, glutamina, glicina, hidroxiprolina, prolina, serina, ácido aspártico y tirosina pertenecen a este grupo.
Estas biomoléculas – los aminoácidos - poseen un grupo R elcual es el distintivo de cada aminoácido, un grupo amino - NH2 - (a excepción de la prolina que tiene un grupo imino, NH) y un grupo carboxilo - COOH -, unidos a un átomo de carbón quiral α (excepto la glicina). Los grupos funcionales NH2 y COOH confieren un comportamiento anfotérico a los aminoácidos comportándose como aminas en algunas ocasiones y como ácidos en otras. En general todos losaminoácidos tienen la misma estructura a pH fisiológico como se observa en la figura 1 a continuación.
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Figura 1. Estructura general de los aminoácidos.
De acuerdo a la estructura anterior, los aminoácidos se pueden agrupar según las propiedades de sus grupos R, en especial su polaridad o tendencia a interactuar con el agua a pH biológico. La polaridad de los grupos R varía enormemente desdetotalmente apolar o hidrofóbico a altamente polar o hidrofílico. Existen 5 clases principales de aminoácidos: con grupos R apolares y alifáticos, con grupos R aromáticos (generalmente apolares), con grupos polares sin carga, con grupos cargados negativamente y con grupos cargados positivamente.
No obstante, las características de los aminoácidos hacen compleja la utilización de métodos clásicos...
Campo, Yolima; González, Julio Cesar; Mosquera, Tatiana; Piedrahita Mauricio.
yoli_campo@yahoo.com; jucegonpo@hotmail.com; tatichevere@hotmail.com; maopc12@hotmail.com.
Facultad de Ciencias Básicas. Laboratorio de Bioquímica, Universidad Santiago deCali, Cali, COLOMBIA.
RESUMEN
Se realizó la separación de una mezcla de aminoácidos mediante cromatografía en papel utilizando los aminoácidos patrón leucina, alanina y acido aspártico y como fácil móvil un solvente con carácter apolar. Se reveló el cromatograma mediante la reacción con ninhidrina y finalmente se identificaron los aminoácidos en la mezcla por comparación con la posición desus correspondientes patrones que expusieron diferentes grados de retención en la fase estacionaria. Los resultados del Rf para los aminoácidos se registraron como 0.67 para la leucina, 0.47 para la alanina y 0.17 para el acido aspártico; el grupo R de cada uno de los aminoácidos fue el factor determinante de la distribución de estos compuestos en el cromatograma.
En la segunda fase de lapráctica, se emplearon reacciones de los aminoácidos con diferentes reactivos para su identificación y presencia de grupos funcionales característicos. En la identificación de aminoácidos todos revelaron compuestos violeta-purpura con la ninhidrina, a excepción de la prolina cuyo viraje fue naranja-amarillo; la prueba fue positiva para todos los aminoácidos.
La reacción xantoproteica resultópositiva para la tirosina y el triptófano con grupos bencénicos, la reacción del nitroprusiato de sodio se confirmó positiva para la cisteína con el grupo SH y la reacción del triptófano con acido glioxilico reveló la presencia de un anillo.
INTRODUCCIÓN
Los aminoácidos son moléculas orgánicas pequeñas que son única fuente aprovechable de nitrógeno para el ser humano y que además son unidadesfundamentales para la síntesis de las proteínas, y precursores de otros compuestos nitrogenados. De esta manera se pueden clasificar como esenciales y no esenciales.
Los aminoácidos esenciales son aquellos que no pueden ser sintetizados en el organismo, y por esa razón deben incorporarse en la dieta mediante ingesta. En esta clasificación se encuentran los aminoácidos histidina,isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano y valina.
En contaste los aminoácidos no esenciales son aquellos que son sintetizados en el organismo. La alanina, arginina, asparagina, cisteina, cistina, glutamina, glicina, hidroxiprolina, prolina, serina, ácido aspártico y tirosina pertenecen a este grupo.
Estas biomoléculas – los aminoácidos - poseen un grupo R elcual es el distintivo de cada aminoácido, un grupo amino - NH2 - (a excepción de la prolina que tiene un grupo imino, NH) y un grupo carboxilo - COOH -, unidos a un átomo de carbón quiral α (excepto la glicina). Los grupos funcionales NH2 y COOH confieren un comportamiento anfotérico a los aminoácidos comportándose como aminas en algunas ocasiones y como ácidos en otras. En general todos losaminoácidos tienen la misma estructura a pH fisiológico como se observa en la figura 1 a continuación.
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Figura 1. Estructura general de los aminoácidos.
De acuerdo a la estructura anterior, los aminoácidos se pueden agrupar según las propiedades de sus grupos R, en especial su polaridad o tendencia a interactuar con el agua a pH biológico. La polaridad de los grupos R varía enormemente desdetotalmente apolar o hidrofóbico a altamente polar o hidrofílico. Existen 5 clases principales de aminoácidos: con grupos R apolares y alifáticos, con grupos R aromáticos (generalmente apolares), con grupos polares sin carga, con grupos cargados negativamente y con grupos cargados positivamente.
No obstante, las características de los aminoácidos hacen compleja la utilización de métodos clásicos...
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