Determinacion De Cloriformes

Determinación de coliformes en aguas

Introducción:

Debido a que un gran número de enfermedades son transmitidas por vía fecal-oral utilizando como vehículo los alimentos y el agua, es necesario contar con microorganismos que funcione como indicador de contaminación fecal. Estos deben de ser constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben tener unasobrevivencia similar a la de los patógenos intestinales y debe de ser capaces
de desarrollarse extraintestinalmente.

El grupo coliforme es constante, abundante y casi exclusivo de la materia fecal, sin embargo, las características de sobrevivencia y la capacidad para multiplicarse fuera del intestino también se observan en aguas potables, por lo que elgrupo coliforme se utiliza como indicador de contaminación fecal en agua; conforme mayor sea el número de coliformes en agua, mayor será la probabilidad de estar frente a una contaminación reciente.

Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se
multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere unsignificado distinto al que recibe en el agua. En productos alimenticios que han recibido un tratamiento térmico (pasteurización, horneado, cocción, etc.), se utilizan como indicadores de malas prácticas sanitarias.

Objetivo:

Identificar los tipos de coliformes en una muestra de agua.

Materiales y equipos:

* Caldo glucosado
* Caldo peptosa
* agar citrato* Tubos de ensayo
* Baqueta
* Vaso de precipitacion
* Cocinilla

Reactivos:

 Caldo triptosa
 Reactivo de kovacs
 Hidroxido de potasio
 Caldo glucosado
 Rojo de metilo
 Naftol
Procedimiento:

1. Aislar por separado, una asada de cada tubo con gas positivo, en placas de agua embo o agar endo.

2. Incubar las placas invertidas por 24 horas a 37ºc, paraobtener colonias aisladas.

3. Picar una colonia representativa por hacer coloracion gram y la prueba de imvic.estas pruebas comprenden lo siguiente.

Prueba de indol:

a) incubar el tuvo con caldo triptosa.
b) incubar por 24 horas a 37ºc.
c) después de las 24 horas adicionar de 2 a 3 gotas de reactivo de kovacs por las paredes.
d) dejar los tubos en reposo y observar laformación de un anillo de color rojo para el resultado positivo, un anillo color amarillo para el negativo.

Prueba de rojo de metilo:
a) incubar los tubos obteniendo conteniendo caldo glucosado.
b) incubar los tubos por 72 horas a 37ºc.
c) después de las 72 horas adicionar 5 gotas de solución rojo de metilo y agitar.
d) anotar como rojo de metilo positivo, la aparición de un colorrojo y como negativo la aparición de un color amarillo.

Prueba de voges proskaver:
a) incubar los tubos de caldo glucosado.
b) incubar a 37ºc por 72 horas.
c) se puede adicionar solución de rojo de metilo y anotar como positivo vp, la aparición de una coloración amarillenta y como negativo la aparición de una coloración roja. En otro caso pipetear por separado 1ml de caldo de cultivo yadicionar 0.06 ml de naftol y 0.2ml de solución de hidroxido de potasio, agitar los tubos y dejar en reposo por 2 a 4 horas. Anotar como positivo el desarrollo de un color rosado.

Prueba del citrato:
a) incubar los tubos de citrato de simmons.
b) incubar a 371c por 24 horas.
c) anotar como positivo un crecimiento visible, acompañado de un cambio de color del medio del color verdeal azul.

Cálculos:

No hubo detección de coliformes en agua.

Determinación de coliformes negativa

Bibliografía:

http://www.monografias.com/trabajos15/analisis-agua/analisis-agua.shtml

http://es.scribd.com/doc/958039/Determinacion-de-coliformes

http://depa.pquim.unam.mx/amyd/archivero/TecnicBasicas-Colif-tot-fecales-Ecoli-NMP_6529.pdf

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