Determinacion de glucosa

ESTUDIO COMPARATIVO DE EXACTITUD EN LA DETERMINACIÓN DE GLUCOSA SÉRICA POR CUATRO MÉTODOS
Marianela Vargas U., Karl Schosinsky N., Eduardo Brilla S., Eduardo Vinocour G. y José Miguel Esquivel Ch*
Key Word Index: Glicemia, methods

RESUMEN Se analizó comparativamente la exactitud, en la determinación de glucosa sérica mediante pruebas de recuperación e interferencia para el método de laotoluidina, un método automatizado que utiliza ferricianuro y dos métodos enzimáti cos, el de la glucosa oxidasa y el de la hexoquinasa. La ley de Beer y Lambert para los métodos de la o-toluidina, ferricianuro, glucosa oxidasa y hexoquinasa se cumplió hasta 600, 300, 600 y 500 mg/dl respectivamente. Se obtuvo una recuperación adecuada para esos métodos, en el mismo orden, hasta 300, 300, 500 (no seevaluó en este caso 600 mg/dl que es el límite máximo de linealidad) y 500 mg/dl. Ene! método de la o-toluidina hubo interferencia marcada por galactosa, manosa y ácido úrico y moderada por fructosa, salicilatos y bilirrubina. En el método del ferricianuro la interferencia fue marcada con fructosa, galactosa, y ácido ascórbico y moderada con creatinina, manosa y salicilatos. En cuanto al de glucosaoxidasa hubo interferencia marcada únicamente por ácido ascórbico y moderada por bilirrubina. Con hexoquinasa hubo interferencia moderada únicamente por fructo sa. Por su exactitud, ambos métodos enzimáti cos son satisfactorios como sustitutos de los métodos tradicionales; sin embargo, el método de la glucosa oxidasa se considera más adecuado por cuanto puede efectuarse con cualquier fotómetro oespectro fotómetro y el reactivo es más estable y de menor precio. [Rev. Cost. Cienc. Méd. 1986; 7(2): 173-179] INTRODUCCIÓN En Costa Rica el método más ampliamente usado para la determinación de glucosa es el de la otoluidina. Desde el punto de vista práctico, presenta el inconveniente de que el reactivo se prepara con ácido acético concentrado y resulta muy irritante para los analistas; además,* Departamento de Análisis Clínicos, Microbiología, Universidad de Costa Rica Facultad de

al ser corrosivo ocasiona un deterioro paulatino de los espectrofotómetros y fotómetros, empleados para las lecturas del producto final coloreado. Por otra parte, el método de la o-toluidina ha sido superado en cuanto a exactitud por los métodos enzimáticos, que usan glucosa oxidasa y hexoquinasa, ya quese ha reportado que los azúcares reductores, varios medicamentos, el ácido úrico, la creatinina y la bilirrubina interfieren en el método de la o -toluidina (4), mientras que en los métodos enzimáticos de la glucosa oxidasa y la hexoquinasa, el número de interferentes es m ínimo y el grado de interferencia variable (2). Debido a las inconveniencias citadas, es nece sario sustituir el método de la o-toluidina por uno con reactivos no cáusticos y de mejor exactitud, que además sea lo suficientemente sencillo y de bajo costo como para ser usado rutinariamente. Al igual que en el método de la o -toluidina, el método automatizado basado en la reducción del ferricianuro es afectado por varias sustancias interferentes, fundamentalmente la creati nina y el ácido úrico, observándos e valores deglucosa falsamente elevados en pacientes urémicos (2). El presente estudio se realizó con el objetivo de evaluar algunas ventajas y desventajas de los métodos de la o-toluidina y el ferricianuro, al compararlos con métodos enzimáticos comer ciales que usan glucosa oxidasa y hexoquinasa. La evaluación consistió en un análisis previo de cada método donde se determinó el efecto del tiempo sobre laformación del producto final coloreado y los intervalos de linealidad. Una vez corroborados estos parámetros, se procedió a evaluar el error proporcional mediante pruebas de recuperación y el error constante mediante pruebas de interferencia (7). Se determinó el efecto interferente de 15 sustancias en cada uno de los cuatro métodos . Este estudio preliminar es básico como criterio para la elección de...