Determinación De La Glucosa

DETERMINACION DE GLUCOSA

Fundamento
En presencia de calor y acido, la Orto-toluidina reacciona fácilmente con la glucosa para formar un complejo coloreado. La intensidad del color establecido esmedido con un espectrofotómetro a 620-650 nm. Y es proporcional a la concentración de glucosa.
Material Biológico
La glucosa puede ser determinada en suero, plasma.
Técnica
Nota.- Evitarrespirar los vapores resultantes de la Orto-toluidina. Se ha sugerido que el procedimiento sea efectuado en una área de buena ventilación o debajo de una campana. No pipetear este reactivo con la boca.1. Marcar 2 tubos o cubetas: blanco y prueba
2. Agregar los sig. Reactivos: al tubo blanco 0.1 ml de agua destilada y al tubo de prueba 0.1 ml de suero o plasma.
3. A cada tubo adicionar 5 mlde Orto-toluidina y mezclar lateralmente.
4. Colocar los tubos en baño de agua hirviendo por 10 minutos.
5. Después de remover los tubos y enfriar a la temperatura del cuarto en unrecipiente con agua corriente por 3 a 5 minutos.
6. Transferir el contenido de los tubos o cubetas y leer la absorbancia de la prueba a 635 nm. (+- 15 nm) usando el blanco como referencia. Completar lalectura antes de 30 minutos.
Reactivos
1. Orto-toluidina
Contiene 6% de Orto-toluidina en ácido acético glacial.
Valores Normales
70 – 100 mg. /100 ml.

DETERMINACION DEL NITROGENO DE UREAPrincipio
La urea reacciona directamente con la diacetil-monoxima para formar un color rosa. La concentración de urea es directamente proporcional a la intensidad del color producido, el cual esmedido espectrofotométricamente entre 515 a 540 nm.
Material Biológico
Puede usarse suero o plasma. La prueba con desproteinización puede usar muestra hiperlipemicas, altamente ictéricas y marcadamentehemolizadas.
Técnica con Desproteinización
1. En el tubo de prueba pipetear 1.8 ml de ácido tricloracético al 3% (frio) y 0.2 ml de suero, plasma o sangre completa y mezclar bien, reposar...