Efecto Del Ph En Una Reacción Enzimática
Objetivo
Que el alumno observe el efecto que tiene el pH en las reacciones enzimáticas, el alumno registrará la actividad relativade la enzima, (trasformando la densidad óptica, medida por el espectrofotómetro) en función al pH.
Fundamento
Los cambios de pH modifican el grado de ionización de todos o de algunos de losgrupos participantes en la reacción, modificando los enlaces iónicos. Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales desus aminoácidos. Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga eléctrica positiva, negativa o neutra.
La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones depocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad.
Para muchas enzimas, el efecto del pH tiene forma de campana con un valor de pH óptimo bien definido,pero para otras la forma de la curva es muy diferente.
El pH, afecta al estado de disociación de los grupos, aunque todas las proteínas no se ven afectadas de igual forma porque algunas notienen grupos disociables. La mayor parte de los enzimas tienen un pH óptimo. Si hay pequeños cambios de pH no se desnaturaliza el enzima. El pH puede afectar de dos maneras:
* La unión delsustrato es mejor o peor que antes.
* Que afecte a la velocidad catalítica de la reacción.
Para muchas enzimas, el efecto del pH tiene forma de campana con un valor de pH optimo bien definido,pero para otras, la curva el muy diferente; este tipo de información se ha utilizado para identificar el sitio activo de los aminoácidos.
Desarrollo:
Tubo | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Densidadóptica. | 0 | | | | | |
[AR] | 0 | | | | | |
Cuestionario:
1.- Elabore la grafica de [AR] en función al pH.
2.- En la grafica obtenida, ubique el pH óptimo de la enzima.
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