Electroforesis
Técnica de laboratorio que se utiliza para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. Esta separación puede realizarse sobre la superficiehidratada de un soporte solido, a través de una matriz porosa, o bien en disolución; por lo general se utiliza para determinar y saber, en el caso de las proteínas, la masa molecular o para detectar cambiosde aminoácidos y separar cuantitativamente distintas especies moleculares; en el caso de los ácidos nucleídos se determina su tamaño, medido en pares de bases.
La mayoría de macromoléculas estáncargadas eléctricamente y, al igual que los electrolitos, se pueden clasificar en fuertes y débiles, dependiendo de la constante ionización de grupos ácidos y básicos.
FACTORES QUE AFECTAN A LAELECTROFORESIS
En general la electroforesis depende directamente del campo eléctrico y este depende de distintos parámetros. Basándose en la ley de Ohm, se tiene que:
V=IR
Diferencia potencial (V):define el campo eléctrico.
Resistencia (R): la movilidad de las moléculas es inversamente proporcional a ella.
Intensidad (I): Cuantifica el flujo de carga eléctrica, se relaciona directamente con ladistancia recorrida por las moléculas.
FUNDAMENTO:
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia elpolo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaranhacia el ánodo (el polo positivo).
El movimiento de las moléculas esta gobernado también por dos fuerzas adicionales; inicialmente la fricción con el solvente dificultará este movimiento originandouna fuerza que se opone , por otro lado las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen energía cinética propia denominado difusión. La energía...
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