electroforesis

 Electroforesis en gel de poliacrilamida
La poliacrilamida es un soporte empleado frecuentemente en electroforesis en gel, es químicamente inerte, de propiedades uniformes, capaz de ser preparadode forma rápida y reproducible. Forma, además, geles transparentes con estabilidad mecánica, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización de las bandas durantetiempo prolongado. Además tiene la ventaja de que variando la concentración de polímeros, se puede modificar de manera controlada el tamaño del poro.3
 Formación del gel de poliacrilamida
Lapoliacrilamida se forma por copolimerización de dos
compuestos, la acrilamida y la bis-acrilamida (N,N'-metilén-bis-acrilamida), en una
reacción iniciada por la tetrametiletiléndiamina (TEMED) y elpersulfato de amonio. El
radical persulfato activa al TEMED, el cual a su vez activa al monómero de acrilamida para
que polimerice. Las cadenas de poliacrilamida son entrecruzadas al azar por labisacrilamida, formándose así una red de porosidad bastante uniforme, que puede ser regulada
variando las condiciones de la reacción y las concentraciones de los monómeros.

  Esta reacción es fuertementeinhibida por altos niveles de oxígeno,5  por lo que la solución debe ser desgasificada para lograr una formación de gel reproducible. Hay muchos factores que desempeñan una función importante en laseparación electroforética, como son pH,  fuerza iónica, gradiente de potencial, tiempo de corrida, concentraciones de acrilamida y bis-acrilamida, etc. Las condiciones óptimas de una buena separación,en la práctica se determinan experimentalmente, con el análisis de cómo influyen los diferentes factores en la electroforesis en cuestión. La naturaleza de la muestra sirve de guía para alcanzar lascondiciones en la que se deben obtener los mejores resultados.6

Entre las diversas técnicas de electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE, por sus
siglas en inglés "polyacrylamide gel...