Electroforesis

Electroforesis
Técnica en la cual una partícula cargada se hace desplazar a través de un medio aplicando un campo eléctrico.
La velocidad de migración es función de la densidad de carga y ésta a suvez es función de una serie de parámetros que marcan las condiciones experimentales como: pH, fuerza iónica, voltaje, interacciones con el soporte.
Factores que afectan la migración de partículas* Carga neta de la partícula: Efecto del pH del tampón.
Cuando las partículas se colocan en un campo eléctrico, estas migrarán hacia el ánodo o el cátodo en función de la carga neta que posean yésta depende del pH de la solución en que se encuentran.

* Tamaño y forma de la partícula
Según el tipo de electroforesis, el tamaño y la forma de la partícula pueden tener mayor o menorimportancia. Cuando se emplean soportes que permiten el paso selectivo de moléculas, según el tamaño, retienen las grandes y dejan pasar las más pequeñas.

* Fuerza iónica del tampón
En laelectroforesis, la corriente es llevada por los iones presentes, tanto del tampón como de las partículas en solución, por tanto cuanto más concentrado es el tampón, mayor proporción de corriente que transportan,menor la migración de las partículas y peor la separación.

* Potencial del campo eléctrico
A mayor potencial del campo eléctrico mayor velocidad de la partícula. Si aumenta el voltaje, aumenta lavelocidad de separación, pero también la temperatura aparecen efectos indeseables como: desnaturalización de proteínas, evaporación del buffer, aumento de la fuerza iónica.

Tipos de soportes
Elprocedimiento electroforético se lleva a cabo sobre dos soportes:

1. Soportes No Restrictivos
Las partículas colocadas sobre ellos, se separan únicamente en función de su carga eléctrica. Losprincipales soportes son: Papel, Acetato de Celulosa, Agarosa.

2. Soportes Restrictivos
El soporte ejerce algún tipo de resistencia al desplazamiento de las moléculas de la muestra. La...