electroforesis

I. INTRODUCCIÓN

La electroforesis es una técnica de separación que puede ser utilizada con fines analíticos y que fue introducida por el químico sueco Arne Tiselius. El interés principal de este investigador fue la química de las proteínas séricas. Por su trabajo pionero en este campo, Tiselius recibió el Premio Nobel en 1948.
Los métodos electroforéticos son de alta sensibilidad, eficacia,poder de resolución y versatilidad.
Método de separación de:
Proteínas
Ácidos nucleicos
Otras biomoléculas
Permite determinar:
Peso molecular de una proteína
Punto isoeléctrico
Distinguir moléculas por su carga neta o su forma



II. OBJETIVOS


Conocer el principio básico de la técnica de electroforesis en la identificación de proteínas.
Identificar los componentesprincipales del electroforesis













III. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

III.1. Electroforesis
La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico a través de una matriz porosa, la cual finalmente las separa por tamaños moleculares y carga eléctrica, dependiendo de la técnica que se use.
La técnica clásica utilizauna tira recubierta de una sustancia porosa impregnada de un electrolito. Sus extremos se sumergen en dos depósitos independientes que contienen ambos al electrolito y están unidos a los electrodos del generador de corriente. La muestra se deposita en forma de un pequeño trazo transversal en la tira. La distancia de migración se mide en relación un marcador interno. Las placas son reveladas consales de plata, azul de Coomassie, o reactivos en particular.


















III.2. Fundamentos y Conceptos Básicos
La electroforesis capilar (CE) es una técnica de separación que se ha desarrollado gracias a los avances de la cromatografía líquida de alta eficacia junto con los procedimientos más tradicionales de electroforesis. Esta técnica permite separar bastante bienbiomoléculas, donde la cromatografía líquida se muestra menos eficaz, y compuestos de pequeña masa molecular, difíciles de estudiar por los procedimientos clásicos de electromigración en soporte.
La electroforesis capilar constituye una adaptación particular de la técnica de electroforesis. Esta técnica separativa se basa en la migración de las especies de la muestra en disolución, portadorasELECTROFORÉSIS Illán Morales Becerril de una carga eléctrica global, bajo el efecto de un campo eléctrico y en contacto con un soporte (medio de desplazamiento) adecuado.
En electroforesis capilar la tira se reemplaza por un tubo capilar abierto en sus extremos, fabricado con un diámetro pequeño (15 a 150µm). El capilar oscila entre 20 y 80cm, y está lleno de una solución buffer. Un detector se encuentraubicado en un extremo del capilar, cerca del compartimiento catódico. La señal obtenida es la base de la obtención del electroferograma, que muestra el registro de la composición de la muestra. Solo las especies que se dirigen hacia el cátodo serán detectadas.
III.3. Métodos de Detección
En la detección UV-Visible se mide la intensidad de la luz que pasa a través del capilar en una pequeña zona enla que se ha eliminado el revestimiento opaco. La detección por fluorescencia resulta más sensible si se emplea una fuente láser muy intenso, asociado a menudo a un procedimiento de preformación de derivados de los analitos portadores de un fluoróforo.
III.4. Técnicas Electroforéticas

III.4.1. Electroforesis capilar en zona o en disolución libre (CZE)
La electroforesis capilar se basa en losmismos principios de las técnicas electroforeticas convencionales, pero utiliza condiciones y tecnología distinta que nos permiten obtener una serie de ventajas al respecto, Esta separación de péptidos realizada sobre un capilar de silica fundida a potenciales elevados 20 a 30 Kv en un campo de 400 a 500 v/cm refrigerados por aire. 
    La corriente electroendosmótica (FEO) generada por los...