electroforesis
S
Escuela Profesional de
Tecnología Médica
Desplazamiento de cargas eléctricas
(moléculas) en un solvente cuando se someten
a la acción de un campo eléctrico
CATODOANODO
El movimiento de una partícula cargada depende de la
intensidad eléctrica, que se opone a la fuerza de
rozamiento
E Z = fv = 6∏nrv
E: campo eléctrico
Z: carga neta
n: viscosidad
r:radio de la partícula
v: velocidad
Factores que afectan la velocidad
Carga
Tamaño
Forma globular, fibrosa
Campo eléctrico
Voltaje ( > voltaje, >velocidad) VIntensidad (> intensidad, > velocidad) I
Resistencia de la partícula al movimiento
› Longitud: > longitud, mayor resistencia
› ancho del soporte: < anchura, < resistencia
V=IxR
Muestra
› Cargao densidad de carga: carga eléctrica/masa de la
molécula
› Tamaño
› Forma: formas globulares avanzan más
Tampón de electroforesis
› pH:
determina el grado de solvatación y la carga delas moléculas generalmente es ligeramente básico
moléculas (-)
› Fuerza iónica: generalmente 0.05 o 0.1 M para que no
interfiera
Soporte
Aplicación
Proteínas engeneral
ADN y ARN
Nucleótidos
Aminoácidos
Polisacáridos
Fosfolípidos
ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
Moléculas con carga neta en un pH distinto al PI
velocidad de migración: carganeta/masa
SOPORTE ELECTROFORÉTICO
Tipos:
1. No restrictivo (Tipo I): Tamaño poro >>> moléculas, no opone
impedimento a su paso separación sólo por CARGA
• Electroforesis de proteínas: • Papel,almidón, agar, acetato de
celulosa
2. Restrictivo (Tipo II): Tamaño poro ≈ moléculas, opone resistencia
a su paso separación por tamaño (tamizado molecular)
•Electroforesis de proteínas: •Separación por CARGA y TAMAÑO
• Acrilamida
•Electroforesis de DNA/RNA: • Separación sólo por TAMAÑO
• Agarosa, acrilamida
Lic Biotecnologa
Nancy
Fricción: fuerza que se opone
Movimiento...
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