Elisa

1.-INTRODUCCIÓN

El ELISA es una técnica inmunoquímica utilizada para detectar y/o cuantificar moléculas. Estas pueden ser tanto antígenos como anticuerpos.
En nuestro caso, el ELISA loutilizaremos para determinar la afinidad de los anticuerpos monoclonales (Mabs: anticuerpo monoclonal es aquel que deriva de un solo clon de linfocito. Se puede producir la cantidad que necesitemos durantetoda la vida). Este ELISA estará mediado por antígeno. Además el método que nosotros hemos utilizados ha sido el indirecto, en el cual el Mab no está marcado, utilizándose un anticuerpo.2.-RESULTADOS

Tras seguir el protocolo prefijado para la realización de este tipo de ELISA, obtuvimos los siguientes resultados:

Tabla1. En la tabla podemos observar los valores de absorbancia obtenidostras la realización del ELISA. Las concentraciones de Mabs están medidas en ng/ml. Los valores que se observan coloreados de amarillo son los que hemos considerado quitar por desviarse en la gráfica.ABS | [Mab1] | ABS | [Mab 2] | ABS | [Mab3] |
1,321 | 10000 | 1,393 | 10000 | 1,427 | 10000 |
1,458 | 5000 | 1,241 | 5000 | 1,259 | 5000 |
1,418 | 2500 | 1,267 | 2500 | 1,167 | 2500 |
1,178 |1250 | 1,111 | 1250 | 1,087 | 1250 |
1,308 | 625 | 0,767 | 625 | 1,015 | 625 |
1,001 | 312,5 | 0,599 | 312,5 | 0,751 | 312,5 |
1,034 | 156,25 | 0,456 | 156,25 | 0,793 | 156,25 |
1,018 | 78,12| 0,305 | 78,12 | 0,837 | 78,12 |
0,76 | 39 | 0,219 | 39 | 0,715 | 39 |
0,717 | 19,53 | 0,131 | 19,53 | 0,535 | 19,53 |
0,402 | 9,76 | 0,112 | 9,76 | 0,353 | 9,76 |
0,099 | 4,88 | 0,085 | 4,88| 0,099 | 4,88 |

A continuación, representamos todos los valores en una gráfica obteniendo curvas de afinidad, a partir de las cuales se podrá cuantificar la afinidad que tienen los anticuerposmonoclonales utilizados en la práctica.

Fig.1. En la figura podemos observar 3 curvas, las cuales establecen un rankig de afinidad. Además están representadas las k50 para cada una de ellas.

En...