Enzima

UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
Departamento de Química
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA QUIM 3402
1 Crédito: 3h/sem
S 8:00 – 11:00 Salón: Q-605

I Semestre del año 2009

PROFESORES:

Andrés Malagon

Luis Fernando Espinel M.

DIRECCIÓNES ELECTRÓNICAS: emalagon@uniandes.edu.co
lespinel@uniandes.edu.co
RESUMEN:
Es de vital importancia el conocimiento de las propiedades físicas, biológicas yquímicas de las
moléculas que constituyen los seres vivos, para poder explicar los procesos desarrollados a
nivel celular. El estudio de estos fenómenos celulares y orgánicos puede ser comprendido y
profundizado por medio de su correcta interpretación desde diversas disciplinas y ciencias tales
como la química orgánica, química analítica, la física, la biología y la fisiología, integradas para
dardesarrollo a la bioquímica como área de la química responsable de la comprensión y
conocimiento profundo de las moléculas y de todos los procesos biológicos en que intervienen,
además de las técnicas analíticas empleadas en el laboratorio para su caracterización y
cuantificación.
OBJETIVOS GENERALES:
•

Definir y explicar las bases biofísicas y bioquímicas del comportamiento de lasmacromoléculas, de sus asociaciones e interacciones intermoleculares.

•

Brindar los principios básicos para realizar a través de la investigación y el análisis, un
estudio de los principales metabolitos primarios involucrados en los procesos
bioquímicos celulares.

•

Analizar los constituyentes químicos que conforman un tejido mediante el
fraccionamiento de estos.

•

Caracterizar cadauna de las fracciones obtenidas de tejido animal o vegetal, mediante
reacciones químicas propias para cada grupo funcional presente en la estructura de
los diversos metabolitos.

•

Caracterizar y cuantificar algunos metabolitos mediante el uso de técnicas
espectrofotométricas.

•

Determinar la actividad de algunos enzimas obtenidas a partir de tejido vegetal o
animal, y el efecto delos cambios de pH, temperatura, concentración de sustrato
sobre su actividad.

•

Adquirir la destreza en la representación gráfica de la cinética en las reacciones
enzimáticas.

CONTENIDO:
Semana 1
Clase Teorica:
Instrucciones generales, distribución de grupos, normas de seguridad en el laboratorio.
Métodos analíticos de separación aplicados a problemas bioquímicos
CromatografíaFina en Capa Delgada TLC.
Cromatografía en columna
Cromatografía líquida de alta eficiencia HPLC
Cromatografía de gases
Métodos de análisis cuantitativo
Espectrofotometría

Semana 2.
Capacidad amortiguadora.
Preparación de soluciones buffer.

Semana 3.
Fraccionamiento y caracterización de tejidos: Carbohidratos, Lípidos ( parte I )

Semana 4.
Fraccionamiento y caracterización detejidos: Carbohidratos, Lípidos ( parte II)
Carbohidratos: Pruebas Lugol, Molish y Benedict. Cromatografia en papel.
Lípidos:
Pruebas de Liebermann-Buchard, Hidroxamato, Fosfatos,
saponificación.
Cromatografia en capa fina de lípìdos.

Semana 5
Fraccionamiento y caracterización de tejidos: Proteínas y ácidos nucléicos. ( parte I )

Semana 6
Fraccionamiento y caracterización de tejidos:Proteínas y ácidos nucléicos. ( parte II )
Proteínas:
Ácidos nucléicos:

Prueba de Millon, Biuret, Xantoprotéica, Ninhidrina.
Hidrólisis, prueba de pentosas y fosfatos.

Semana 7.
Determinación cuantitativa de proteínas ( Método Buiret – Método Kjeldahl )

Semana 8
Clase teórica:
Métodos de caracterización
Electroforesis de proteínas
Electroforesis de DNA
Práctica: Electroforesis deproteínas; Electroforesis de DNA y RNA
Semana 9
Enzimología I:
Efecto de las variaciones de pH y temperatura sobre la actividad de la amilasa salival.
Semana 10
Enzimología II:
Variación de la concentración de sustrato en el tiempo.
Determinación de la constante de velocidad de primer orden de la reacción catalizada.
Semana 11
Metabolismo de carbohidratos fermentación ( Parte I )...