ES TUD IO DE LA I NM UN OG EN ICI DAD Y C APA CI DAD PR OTECTORA D E UNA BIB LIO TECA G ENOM ICA DE EXP RESI ON D E Trypa nosoma cruzi EN RATON ES B AL B/c.

IPK
Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”
Subdirección de Parasitología.
ES TUD IO DE LA I NM UN OG EN ICI DAD Y C APA CI DAD PR OTECTORA D E
UNA BIB LIO TECA G ENOM ICA DE EXP RESI ON D E Trypa nosoma cruzi EN
RATON ES B AL B/c.
Trabajo de tesis en opción al grado científico de
Doctor en Ciencias Médicas.
Autor Dr. Esteban Alberti Amador.
Tutores Dr.C Armando AcostaDomínguez
Dr.C María E Sarmiento García San Miguel
La Habana
2004
SÍNTESIS
Para contribuir al estudio de la respuesta inmune frente a la infección con T.cruzi y al desarrollo de
vacunas de nueva generación, se construyó una biblioteca genómica de expresión de T. cruzi en un vector
de expresión en células eucariotas,
con la cual se inmunizaron ratones machos de la línea isogénica
BALB/cpor la vía intramuscular. En este modelo experimental se estudió la expresión de antígenos del
parásito por IFI en el sitio de inoculación, la respuesta inmune humoral específica por ELISA y Western
Blot (WB), la respuesta de linfoproliferación específica, así como la protección inducida frente al reto con
T. cruzi y Leishmania amazonensis. También se estudió la presencia de distintosmarcadores de
autoinmunidad, después de la inmunización con la biblioteca de expresión. Se evidenció la expresión de
antígenos en el músculo esquelético de los ratones inmunizados con la genoteca, al enfrentarlos con
sueros de pacientes afectados con la Enfermedad de Chagas. Se obtuvo una respuesta de anticuerpos
significativa, detectada por ELISA en los sueros de los ratonesinmunizados con la biblioteca y con
antígenos solubles de T.cruzi en la sexta semana post- inmunización. En el estudio por Western Blot (WB)
se evidenció el reconocimiento de múltiple s bandas al enfrentar los sueros contra antígenos solubles de T.
cruzi. Se observó estimulación de linfocitos en el grupo inmunizado con una dosis de la biblioteca y con
los antígenos solubles. Fue puesta enevidencia la capacidad de los ratones inmunizados con la biblioteca
genómica de expresión de controlar la infección aguda producida por los trypomastigotes de T. cruzi. La
evolución de la lesiones en todos los grupos estudiados después del reto con L. amazonensis demostró la
no existencia de protecció n cruzada. La vacunación no provocó la inducción de anticuerpos anti ADN de
doble o simplecadena, anticuerpos antinucleares y contra músculo cardiaco. Se observó un aumento
transitorio del Factor Reumatoideo IgG en los ratones inmunizados con la biblioteca genómica de
expresión de T.cruzi. Nuestros hallazgos sugieren que la inducción de respuestas autoinmunes frente al
ADN utilizado en la inmunización es poco probable.
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CAPITULO I.- INTRODUCCIÓN........................................................................................................... 6
I.1 INTRODUCCIÓN ...................................................................................................................................... 6
I.2 HIPÓTESIS:........................................................................................................................................... 11
I.3 OBJETIVOS ............................................................................................................................................ 11
I.4 NOVEDAD CIENTÍFICA ......................................................................................................................... 12
I.5 E L VALOR TEÓRICO............................................................................................................................. 12
I.6 E L VALOR PRÁCTICO ............................................................................................................................ 13
CAPITULO II.- INFORMACIÓN PREVIA.......................................................................................... 14
II.1 TRIPANOSOMIASIS AMERICANA...