Esterilización (Curso Introductorio)

Esterilización
•Equipos •Perfil Térmico •Normas
By Lic. Pablo Keimel

Plan
¿Qué es esterilización y qué es contaminación biológica? Distintos métodos para descontaminar. Equipos. Normas. Informes de Perfil Térmico.

Algunas definiciones
Esterilización:
El uso de un procedimiento físico y/o químico para destruir toda la vida microbiana, incluso los endosporos bacterianos.Depirogenado:
Destrucción de pirógenos-endotoxinas (substancias que producen fiebre sin que haya infección)

Algunas definiciones
Desinfección:
Elimina prácticamente todos los m.o. Reconocidos como tales pero no necesariamente todas las formas

Antiséptico:
Substancia que se usa en tejido vivo o sobre él para inhibir o destruir m.o.

Agentes patógenos
Virus. Bacterias vivas. Endosporos. Hongos ylevaduras. Cápsulas y Pirógenos (endotoxinas) Priones.

Agentes patógenos

Bacteria

Agentes patógenos

Virus

Mecanismos de acción:
Virus:
utilizan a la célula para crear copias de sí mismos la célula muere en el proceso

Bacterias / hongos y levaduras
invasión de células y/o destrucción directa compiten por los recursos (oxígeno, alimento, espacio vital) producen toxinasMecanismos de acción:
Endosporos:
son formas de resistencia de las bacterias poseen pared celular más gruesa desecación del citoplasma descenso del metabolismo

Cápsulas y Pirógenos (Endotoxinas)
Activan el Sistema inmunológico y producen inflamación, fiebre, infiltración de líquidos, etc.

Mecanismos de acción:
Endotoxinas:
son lipopolisacáridos de la membrana bacteriana. se liberan sinalteración de la membrana y cuando se produce la lisis de la bacteria (destrucción).

Exotoxinas
son substancias liberadas durante la proliferación del m.o. ejercen su acción a distancia.

Mecanismos de acción:
Priones (enfermedad de la vaca loca):
son proteinas naturales alteradas. se unen a la proteina normal y la alteran. Son extremadamente resistentes a la desnaturalización térmica(inactivación por calor)

Normas
USP 25 / NF 20 (United States Pharmacopeia /National Forum) BP / EuPh (Britanica / Europea) FNA (Farmacopea Nacional Argentina) PDA (Parenteral Drugs Asociation)

Métodos
Calor húmedo:
Autoclaves (tipo Chamberlain, desplazamiento pasivo, desplazamiento por vacío, vapor fluente). USP / IRAM / PDA: → 121,1 ºC / 15 min + el tiempo que tarda la carga en llegar ala temperatura (se hace una corrida con carga con un sensor en el interior de la carga).

Métodos
Calor seco:
Estufa con o sin circulación forzada USP / PDA, Tech. Bulletin nº3 / Ackers & Anderson → 170 ºC / 15 min (Z = 20 ºC)

Depirogenado:
USP, → 250 ºC / 3 h BP, Appendix XIV D. Test for pyrogens: → 250 ºC / 30 min ó 200 ºC / 1 h (Z = 54 ºC)

Métodos
Gases:
Oxido de etileno, óxidode propileno, formaldehido. Destrucción por oxidación directa e indirecta (formación de peróxidos y radicales libres) Condiciones críticas: concentración (0,5 g/L EtO), temperatura (40 a 50 ºC), humedad relativa (60 %), humedad del material (preacondicionar 24 hs), penetrabilidad (menor que el vapor) y tiempo (2 a 4 hs). completa remoción final del esterilizante controles biológicos con cada cargaMétodos
Radiación:
Ultravioleta, acción directa (254 nm) Ultravioleta, generación de ozono (180 nm) Radiación γ Generan peróxidos y radicales libres que oxidan los componentes celulares (destrucción de proteinas, ADN, ARN, permeabilización de membranas, etc.).

Tolerancias
Autoclave:
USP: ± 1 ºC respecto a la media FDA: ± 0,5 ºC respecto a la media ± 2,5 ºC en la etapa de estabilidad(variación en el tiempo)

Estufa de Depirogenado:
USP: ± 15 ºC, “... cuando la unidad opera a no menos de 250 ºC.”

Efectividad
Probabilidad de que un m.o. Sobreviva al tratamiento. Nunca se obtiene un 100 %. En la práctica se calcula como la relación entre la cantidad de formas vivas final sobre la inicial.

Efectividad

Esterilización
Valor inicial (N0)

Organismos viables
1...