Estimación cuantitativa de proteínas mediante el método de Biuret

el objetivo es:

En esta práctica se ha tratado de determinar la concentración de una solución problema de proteína mediante la técnica de la colorimetría.
En los métodos colorimétricos hay queconstruir una recta de calibrado representando absorbancias frente a concentraciones de una solución de proteína estándar, en nuestro caso hemos utilizado una solución de albúmina de suero bovino de2.5 mg/ml diluida con distintos volúmenes de agua. Por lo que respecta a las absorbancias, estas se pueden determinar pasando un haz de luz blanca en un espectrofotómetro a través de las soluciones dealbúmina a distinta concentración a las que se ha añadido un determinado volumen, en nuestro caso 5 ml, de reactivo de Biuret; de manera que algunas longitudes de onda se absorben con preferencia sobreotras. Según este método, si una solución fuertemente alcalina de sulfato cúprico (reactivo de Biuret) se añade a una solución de proteína se forma un complejo entre el ión cúprico y los enlacespeptídicos, con aparición de una coloración violeta-púrpura, que representa un máximo de absorción a 545 nm. Además, cabe destacar que si se sigue la Ley de Lambert-Beer: Abs = ε·c·I, la concentración delcompuesto es proporcional a la absorbancia y a la intensidad de color. Siguiendo la ley anterior y manteniendo constante “I” (paso óptico, 1cm), la representación es una recta que pasa por el origen.Una vez obtenida la recta se interpolan los valores obtenidos en la solución problema para obtener su concentración.

2. Calcula la concentración de proteína en los tubos problema: tubos 7,8 y 9.¿Deberían ser iguales?
A partir de la ecuación de la recta, (y = 0.0846x + 0.0076), y teniendo los valores de absorbancia, (en la ecuación “y”), para dichos tubos podemos determinar la concentración,(en la ecuación “x”), de proteína problema.

7. Abs.= 0.055 c= 0.56 mg/ml
8. Abs.= 0.10 c= 1.09 mg/ml
9. Abs. = 0.135 c= 1.5 mg/ml

Observamos que las concentraciones...