DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA POR EL MÉTODO DE BIURET

RESULTADOS
En la siguiente tabla se resumen los resultados obtenidos en el espectrofotómetro en función a la concentración de la solución patrón de proteína (albúmina).
TABLA DE RESULTADOS.MEDICIÓN CON ESPECTROFOTÓMETRO A DISTINTAS CONCENTRACIONES DE UNA SOLUCIÓN DE ALBÚMINA
Tubo
Concentración de Albumina (mg/l)
Absorbancia
1
0.33
0.025
2
0.66
0.055
3
1
0.083
4
1.33
0.113Problema
0.7
0.057





Se grafico concentración vs absorbancia para los tubos del 1-4, con lo que se obtuvo una curva patrón que permitió hacer un análisis por interpolación de la concentraciónde la solución problema (grafica 1).
Gráfica 1: Absorbancia vs Concentración de Proteína
La concentración de la muestra problema, obtenida mediante interpolación de la gráfica es de 0.7mg/mlaproximadamente.

De la gráfica se obtiene la ecuación de la recta en forma :

Se despeja x:

Se sustituye el valor de la absorbancia (y) de la muestra problema para conocer su concentración (x):

Seobtiene un valor de concentración de proteína de 0.5822mg/ml.

El coeficiente de correlación R2 = 0.9998 es muy cercano a 1, esto indica que el grado de relación entre las dos variables es muygrande

DISCUSIONES
El método de Biuret se basa en la adición de un compuesto de cobre a una solución que contenga alguna proteína. Esta solución se coloreará púrpura, ya que los iones cúpricos estaránformando complejos con los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forman parte de los enlaces peptídicos. “Si una solución fuertemente alcalina de sulfato cúprico (CuSO4) se añade a unasolución de proteína se forma un complejo de coordinación entre el catión divalente de cobre y cuatro átomos de nitrógeno, dos de cada cadena peptídica, con aparición de una coloraciónvioleta-púrpura, que presenta un máximo de absorción a 540 nm.” (Nollet, 1996).
“La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados....