Estudio Longitudinal

Dermatología Rev Mex 2010;54(3):113-119

Artículo original Estudio longitudinal de mediadores inflamatorios (TNF-α e IL-1β mediante técnica de ELISA) en lesiones de actinomicetoma provocadas por inoculación de Nocardia brasiliensis en ratones Balb/c
Alejandro Palma Ramos,* María Vanesa Cuevas Moreno,** Laura Estela Castrillón Rivera,* María Elisa Vega Memije,** Roberto Arenas Guzmán***

RESUMENAntecedentes: el micetoma es un síndrome inflamatorio muy común en México que afecta principalmente la piel y el tejido celular subcutáneo y, en menor medida, la fascia, los músculos e incluso los huesos y los órganos internos. Es causado por actinomicetos (actinomicetoma) o por hongos verdaderos (eumicetoma). La intensa inflamación que induce se distingue por el agrupamiento de neutrófilospolimorfonucleares alrededor de los granos en respuesta a la infección. La continuidad de este proceso puede ser consecuencia de la elevada producción de mediadores locales o sistémicos, como las citocinas proinflamatorias como el TNF-α y la IL-1β. Objetivo: demostrar la presencia de TNF-α e IL-1β en los sueros de ratones Balb/c inoculados con Nocardia brasiliensis en el cojinete plantar, durante laformación de los granos en el actinomicetoma. Material y métodos: se aisló Nocardia brasiliensis de un paciente con micetoma diagnosticado en el servicio de dermatología y micología del Hospital General Dr. Manuel Gea González. A partir del cultivo, se preparó una suspensión a una concentración de 100 mg/mL, y se inoculó (0.02 mL) por vía subcutánea en el cojinete plantar derecho de 62 ratones Balb/chembras, de 45 a 60 días de edad, que pesaban entre 20 y 25 gramos, así como 0.02 mL de solución salina estéril en el cojinete plantar izquierdo (control). Los ratones se sacrificaron mediante dislocación cervical de acuerdo con el calendario establecido (24 horas, 15 días, un mes, dos meses, dos meses y medio, tres meses, tres meses y medio, cuatro meses, cuatro meses y medio, cinco meses, cincomeses y medio, seis meses, seis meses y medio), y se les cortaron las patas inoculadas con solución salina (cojinete plantar izquierdo) y Nocardia (cojinete plantar derecho), se fijaron en formol al 10% y se procesaron histológicamente. Los cortes se analizaron mediante las técnicas de tinción de hematoxilina-eosina y Ziehl-Neelsen. Para la prueba ELISA se utilizó: a) Quantikine Immunoassay MouseTNF-α R & D Systems (cat. MTA00) y b) Quantikine Immunoassay Mouse IL-1β , R & D Systems (cat. MLB00B). Resultados: el micetoma se manifiesta como un proceso inflamatorio agudo que se distingue por la existencia de neutrófilos a las 24 horas y a los 15 días de la inoculación; después de un mes, el infiltrado cambia y se observan histiocitos epitelioides y vacuolados, linfocitos y algunas célulasplasmáticas; finalmente, en el tercer mes son evidentes los neutrófilos alrededor del grano y abundantes histiocitos. Durante todo el estudio, las cifras de TNF-α fueron de 100 a 150 pg/mL y las de IL-1β de 30 a 50 pg/mL. Conclusión: la elevación de las concentraciones de TNF-α e IL-1β durante todo el ensayo (6.5 meses) permite vincularlas con el carácter inflamatorio de este síndrome. El origende estas citocinas no puede ser linfocítico, ya que no se observan cuatro meses después de la infección en los animales infectados ni en los pacientes con micetoma de varios años de evolución; por esta razón, es posible que el queratinocito sea su origen en el actinomicetoma, en virtud de que es una célula cutánea con propiedades inmunocompetentes. Palabras clave: actinomicetoma, mediadoresinflamatorios, Nocardia brasiliensis.

ABSTRACT
Background: Mycetoma is an inflammatory syndrome frequently found in Mexico. Usually skin and subcutaneous tissue are involved, as well as muscle, bone and internal organs. It is caused by actinomycetes (actinomycetoma) or fungi (eumycetoma). Intense inflammation is mainly characterized by the presence of polymorphonuclear neutrophils in grains produced...