Extendido Cromos mico


Extendido Cromosómico
Pérez Ochoa Gloria Marcela
Ingeniería Agronómica,  Facultad de ciencias agrarias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín glmperezoc@unalmed.edu.co  

25/08/ 2015
RESUMEN
Para llevar a cabo la práctica utilizaron una placa con extendido cromosómico proveniente de una muestra de sangre periférica elaborada previamente, cultivando células in vitro con un mitógenoapropiado (Fitohemaglutinina (PHA)) para estimular la división celular de los linfocitos, luego se acumuló las células en metafase por medio de la adición de Colchicina que detiene la formación de microtúbulos, para agregar el tratamiento hipotónico (KCL) que aumenta el volumen de la célula que se encuentra en esta fase del ciclo celular, produciendo lisis y la difusión de los cromosomas, con lo quese fija el material con una solución 3:1 de Metanol y Ácido Acético, para garantizar la conservación, y que se pudiesen dispersar los cromosomas por medio del goteo de las células hipotonizadas en la placa a 50 centímetros de distancia, para teñirlas con Giemsa y poder realizar el barrido determinado (Figura 1) para hacer el conteo de 2000 núcleos con actividad celular, con lo que se identificólas diferentes estructuras cromosómicas de los núcleos que se encontraban en metafase, y se estableció por medio del número de éstos que el organismo con el que se estaba trabajando podría ser un conejo.
Palabras claves: mutaciones, metafase, organismo, diploide, trisomía, monosómico.
INTRODUCCION
En citogenética es importante el análisis de las variaciones en los cromosomas, ya sea de numero o deestructura, para identificar los fenómenos genéticos asociados a ellos, esta práctica se enfocó en las variaciones de número que pueden ser “euploidia que son aquellos organismos que tienen un numero de cromosomas que es múltiplo de cierto número básico (n) (mono, tri, tetra y poli-ploidia) o aneuploidia que son aquellos organismos que pueden presentar variaciones en el número de cromosomas que nose refieran a juegos completos, sino solamente a partes de un juego ( mono, tri, tetra, dobletri y nulo-sómico)” (STANSFIELD, 1971), puesto que por medio del conteo de cromosomas pudieron identificar con qué tipo de organismo trabajaron (Tabla 2), y verificar si existían alteraciones en el número de estos, al igual que calcular en índice mitótico con la formula (2), remplazando los datos de latabla (1).

MATERIALES Y METODOS
Se utilizó el microscopio para hacer un barrido como se muestra en la figura 1 (Anexo2), en la placa con extendido cromosómico a un aumento de 40X hasta contar 2000 núcleos en actividad celular (activos y en metafases) como se observa en la tabla 1, lo cual fue posible por las diferentes estructuras que estos presentan cuando están activos (mayor tamaño y de colorrosado-violeta), inactivos (menor tamaño y de color morado) o en estado mitótico (son visibles los cromosomas).

RESULTADOS
N° de Placa
Activos
Metafase
Totales
NN
1803
197
2000
Tabla 1. Numero de núcleos activos y en metafase encontrados en el barrido de la placa NN.
Metafase
N° Cromosomas
Promedio
Especie
1
 43
 
 
2
 44
 44
 
3
 45
 
 Conejo
4
 44
 
 
5
 44
 
 
Tabla 2. Numero de cromosomascontados en los núcleos escogidos (ver anexo1) que se encontraban en metafase.

%
Formula (2)

DISCUSION
Con el conteo de los cromosomas obtuvieron que el organismo diploide con 2n: 44, podría ser un conejo, con un índice mitótico que refleja que la proporción de las células que se encontraban en metafase al momento del montaje en la placa es de 9,85%.
“Este índice es una buena medida de laduración relativa de la mitosis frente a la interfase, siempre y cuando la población celular analizada esté en un estado de equilibrio dinámico, cosa que no siempre es fácil de precisar en el laboratorio” (LACADENA, 1996)
Por otra parte como se observa en la tabla 1, en el conteo de los cromosomas se pudo apreciar que había por lo menos un núcleo en metafase con cromosomas 2n+1 y uno 2n-1, que pudo...