Extinción celular de romanowsky

Tinción de Romanowsky

La tinción de Romanowsky es una técnica de tinción prototípica que fue predecesora de varios métodos distintos, pero basados en principios similares entre los que se incluyenlas tinciones de Giemsa, Jenner, Wright, Field, y Leishman, las cuales son utilizadas para diferenciar diferentes tipos de células en especímenes patológicos.

Examinación microscópica deextendidos sanguíneos

Para este propósito Paul Ehrlich en 1879 había comenzado utilizando una mezcla de colorantes ácidos y básicos, por ejemplo fucsina (colorante ácido) y azul de metileno (colorantebásico).2 En 1891 Ernst Malachowski 3 4 5 y Dmitry Leonidovich Romanowsky6 7 8 desarrollaron de manera independiente sendas técnicas haciendo uso de una mezcla de Eosina y azul de metileno modificado queprodujo una sorprendente tono imposible de atribuír a ninguno de los componentes de tinción: un hermoso, distintivo color púrpura9 10 Los requerimientos para que ocurra el efectoMalachowski-Romanowsky-Giemsa son:
Un colorante catiónico: el mejor colorante es el Azur B y, a pesar de que el colorante Azur A es el responsable del color púrpura del núcleo, el azul que confiere al citoplasma esinferior. Ningún otro colorante catiónico que no sea el azul de metileno resulta adecuado.
Un colorante aniónico: El mas comúnmente utilizado es la Eosina Y.11
Debido a que las soluciones acuosas decolorantes eran inestables, se introdujo metanol como un disolvente, y William Boog Leishman12 y James Homer Wright 13 abogaron también por el uso de metanol como fijador antes de la tinción. Gustav Giemsamejoró esta técnica mediante la estandarización de las soluciones de colorantes y la adición de glicerol para aumentar su estabilidad. 14
La demetilación del azul de metileno en solución acuosautilizando calor y un álcali produce una mezcla de Azure A, Azure B, violeta de metileno y azul de metileno. Luego se añade Eosina Y para producir un colorante "neutro". El precipitado formado se...