Extracción Adn
Páginas: 3 (540 palabras)
Publicado: 6 de noviembre de 2015
Extracción adn
En la extracción de ADN, se usó un baja lenguas para poder frotar cuidadosamente la mucosa interna de un ser humano durante 40 segundos ,luego de esto, el baja lenguas seintrodujo en un tubo de Falcón de 15 mL. Después, se enjuagó la cavidad bucal durante un minuto con una solución salina entregada en un vaso; dentro de este enjuague se agito el baja lenguas, para poderverter esta mezcla de una forma cuidadosa en el tubo de falcón, de esta manera, se realizó una posterior centrifugación a temperatura ambiente durante 7 minutos. Ya terminada la centrifugación, sedescartó el sobrenadante y se añadió 20 ul de proteinasa K , para poder incubar durante 40 minutos a 56°C, luego de esto; se pasó 600 ul del lisado celular a un tubo Eppendorf y se agregó 60 ul deacetato de sodio 3M. Se añadió a cada tubo, 0.8 ml de isopropanol frio y nuevamente se incubo y se centrifugo durante 20 minutos, ya realizado este proceso, se descartó el sobrenadante y se agregó1 ml de etanol al tubo, para poder centrifugar de nuevo, luego, se suspendió en 30 μl de agua desionizada estéril y finalmente, se almacenó a -20 °C hasta cuantificar y mediante la electroforesisevaluar el ADN extraído, lo cual se realizó de una manera exitosa.
Electroforesis de ácidos nucleicos en gel de agarosa
En primera instancia, se preparó el gel agarosa usando el volumennecesario, luego de esto, se prepararon las 3 muestras: 1 de ADN humano, 2 reacciones de PCR se mezcló con buffer de carga 6X, lo cual permitió visualizar la muestra durante la siembra, y luego de habersembrado las muestras, se conectó los electrodos de manera que los pozos del gel quedaran en el polo negativo, y correr la electroforesis a 80 voltios durante 1 hora.
Pcr
Volúmenes para la mezcla dereacción de PCR.
Reactivo Volúmenes a pipetear Concentración final
1 reacción 2 reacciones
H20 :...
En la extracción de ADN, se usó un baja lenguas para poder frotar cuidadosamente la mucosa interna de un ser humano durante 40 segundos ,luego de esto, el baja lenguas seintrodujo en un tubo de Falcón de 15 mL. Después, se enjuagó la cavidad bucal durante un minuto con una solución salina entregada en un vaso; dentro de este enjuague se agito el baja lenguas, para poderverter esta mezcla de una forma cuidadosa en el tubo de falcón, de esta manera, se realizó una posterior centrifugación a temperatura ambiente durante 7 minutos. Ya terminada la centrifugación, sedescartó el sobrenadante y se añadió 20 ul de proteinasa K , para poder incubar durante 40 minutos a 56°C, luego de esto; se pasó 600 ul del lisado celular a un tubo Eppendorf y se agregó 60 ul deacetato de sodio 3M. Se añadió a cada tubo, 0.8 ml de isopropanol frio y nuevamente se incubo y se centrifugo durante 20 minutos, ya realizado este proceso, se descartó el sobrenadante y se agregó1 ml de etanol al tubo, para poder centrifugar de nuevo, luego, se suspendió en 30 μl de agua desionizada estéril y finalmente, se almacenó a -20 °C hasta cuantificar y mediante la electroforesisevaluar el ADN extraído, lo cual se realizó de una manera exitosa.
Electroforesis de ácidos nucleicos en gel de agarosa
En primera instancia, se preparó el gel agarosa usando el volumennecesario, luego de esto, se prepararon las 3 muestras: 1 de ADN humano, 2 reacciones de PCR se mezcló con buffer de carga 6X, lo cual permitió visualizar la muestra durante la siembra, y luego de habersembrado las muestras, se conectó los electrodos de manera que los pozos del gel quedaran en el polo negativo, y correr la electroforesis a 80 voltios durante 1 hora.
Pcr
Volúmenes para la mezcla dereacción de PCR.
Reactivo Volúmenes a pipetear Concentración final
1 reacción 2 reacciones
H20 :...
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