Extracción de ADN de una tejido vegetal
En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de las células de pulpa de plátano poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, quepermite el empaquetamiento en el núcleo celular de larguísimas cadenas de esta molécula.
Tras la extracción se realizará una tinción específica del ADN obtenido.
Material necesario- Un plátano - Batidora de mano - Matraz
- Filtro tipo cafetera - Embudo para filtrar - Alcohol 96º muy frío
- Pipeta Pasteur - Tubo de ensayo - Gradilla
- Vaso para batir - Agua destilada -Espátula
- Vaso de precipitados - Detergente tipo lavavajillas - Un poco de sal común
Fundamento
El ADN se encuentra en el interior del núcleo de todas las células, disperso y muy replegado,unido a proteínas para formar la cromatina. Por lo tanto, podremos extraerlo a partir de prácticamente cualquier material de origen biológico. Para ello es necesario homogeneizar el tejido disgregándoloy separando sus células y demás componentes, luego romper las células para separar el núcleo y romper éste para liberar el ADN, separarlo de las proteínas y precipitarlo para separarlo de la soluciónacuosa.
El ADN (y también algo de ARN) aparecerá entonces como un agregado de fibras blanquecinas de aspecto mucoso que se adhieren a una varilla de vidrio o a la pipeta. Podemos añadir unas gotasde azul de metileno o verde de metilo al tubo para teñirlo. Por último, se puede situar sobre un porta, teñirlo de la misma manera y observarlo al microscopio. También se puede conservar dejándolosecar sobre papel de filtro o suspendido en alcohol al 50% o 70%.
Procedimiento
Batir un plátano en 250 ml de agua destilada (o mineral en su defecto, pero no del grifo) durante 15 a 20segundos hasta obtener una papilla homogénea.
Por otra parte, en un vaso de precitados pequeño se mezcla una cucharada de champú o lavavajillas líquido con dos pizcas de sal de mesa.
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