Extracciòn, Visualizaciòn Y Electroforesis De Adn

Universidad del Pacifico
Escuela de Agronomía
Introducción a la Bioingeniería



Informe N° 5
EXTRACCIÓN, VISUALIZACIÓN Y
ELECTROFORESIS DE ADN








Nombre: Rojas P. CarlosFecha: Julio 06 de 2012
Profesor(a): Maldonado V. Carola




INDICEN° Pág.
1-. Introducción………………………………………………………………………..3
2-. Objetivos……………………………………………………………………………5
2.1-. Generales
2.2-. Específicos
3-. Materiales y Métodos……………………………………………………………..6
3.1-. Materiales
3.2-. Reactivos
3.3-. Procedimientos
4-. Resultados…………………………………………………………………………..9
5-.Discusión……………………………………………………………………………11
6-. Conclusiones……………………………………………………………………….13
7-. Bibliografía…………………………………………………………………………..14











1-. INTRODUCCION
La información necesaria para la construcción de los seres vivos se encuentra almacenada en los ácidos nucleicos. Su nombre deriva de su carácter ácido y del hecho de que fueron descubiertos en el núcleo de las células eucariontes. Existen dos variedades químicas de ácidos nucleicos:el DNA (ácido desoxirribonucleico) y el RNA (ácido ribonucleico). Generalmente, la información genética se almacena en forma de cromosomas de DNA y se expresa en forma de mRNA (RNA mensajero) (Dorado, 2007).
El ADN está compuesto por la unión ordenada de miles de nucleótidos; los que a su vez, están formados por la unión de una base nitrogenada a un azúcar; y a esta se une a un grupo fosfato. ElADN se guarda en el núcleo celular en donde adopta una forma ovillada, súper enrollada, ocupando el menor volumen posible (Guía laboratorio: Extracción, visualización y electroforesis de ADN, 2012).
El ADN está compuesto por 3 niveles estructurales. El primero es la Estructura Primaria que es la secuencia o cadena de los nucleótidos con sus respectivas bases nitrogenadas. Le sigue la EstructuraSecundaria secuencia de dos cadenas de nucleótidos ordenados en una doble hélice y estabilizada mediante enlaces Puente de Hidrógeno, en lo que se denomina “Complementariedad de bases”. Y por último la Estructura Terciaria es la doble hélice, enrollada sobre sí misma, formando un ovillo semiesférico, compacto y apretado. Hay pequeñas proteínas que ayudan a éste efecto. Estas estructuras se puedenromper secuencialmente si se emplean reactivos químicos apropiados y condiciones experimentales adecuadas como: PH, temperatura, polaridad, etc. (Guía laboratorio: Extracción, visualización y electroforesis de ADN, 2012).
Para realizar el aislamiento de los ácidos nucleicos se necesita un detergente adecuado para poder digerir previamente las membranas citoplasmáticas, nuclear y desnaturalizar lasproteínas asociadas a estos. Una vez que ha actuado el detergente, se trata la solución con disolventes orgánicos (fenol, cloroformo, alcohol isoamilico, etc). Tras una centrifugación, en el precipitado (fase orgánica más densa) quedan los lípidos de membrana, en la interfase quedan las proteínas desnaturalizadas y en el sobrenadante (fase acuosa menos densa) quedan disueltos los ácidos nucleicos.Se separa el sobrenadante y se añade alcohol absoluto, el cual insolubiliza el ADN, que va quedando en forma de fibras. Además, al extraer ácidos nucleicos, se pueden detectar fácilmente pequeñas diferencias entre moléculas similares de ADN y ARN separándolas mediante electroforesis en gel. En muchos tipos de geles, la movilidad electroforética de un...