extracción de dna

Química Biológica I TP 10 DNA: extracción, identificación y reconocimiento

OBJETIVO:
-Utilizar técnicas sencillas para extraer ADN de tejido vegetal.
-Extraer ARN de levadura
-Reconocer loscomponentes estructurales del ARN y ADN.
FUNDAMENTO:
Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden
encontrar en las células asociados a proteínas formandocomplejos llamados núcleo-proteínas.
Estas proteínas tienen carácter básico mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se
conocen dos grupos de ácidos nucleicos: RNA (ácido ribonucleico) y el DNA(ácido
desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce nucleótidos. Si la
hidrólisis continúa se producen nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases púricas ypirimidínicas.
La función biológica de los ácidos nucleicos es fundamental: el DNA está asociado con el
material genético de las células, pudiendo encontrarse como una sola cadena en algunos
microorganismos oformando parte de núcleo-proteínas de los cromosomas en organismos
superiores. Almacena información genética y sirve de molde para la síntesis de proteínas. Se
encuentra mayoritariamente en elnúcleo y en muy poca cantidad en mitocondria y
cloroplastos. El RNA participa en la síntesis de proteínas y se distribuye en toda la célula,
mayormente en citoplasma en forma soluble o formando parte delos ribosomas.
El protocolo básico de extracción de DNA consiste en el tratamiento del homogeneizado con
disolventes orgánicos (fenol, cloroformo o ambos)
Para evidenciar la presencia de ácidosnucleicos en extractos celulares vegetales se requiere
células en cantidad suficiente y en medio libre de interferencias que puedan causar lisis celular
o hidrólisis de los ácidos nucleicos pornucleasas. Una completa extracción de ácidos nucleicos
es fundamental para la determinación indirecta.
Una hidrólisis ácida remueve todas las bases púricas (hidrólisis de uniones N-glicosídicas entre...