Glicohemoglobina en sangre

EXPLICACION DE LA PRUEBA
A través de la circulación de los glóbulos rojos, la glicohemoglobina se forma continuamente por la adición de la glucosa en la terminal “N” de la cadena Beta de laHemoglobina. Algunos investigadores recomiendan que el nivel de glicohemoglobina es se ubica como control del diabético.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
Una preparación memorizada de sangre completa se mezclacontinuamente con una resina de intercambio iónico de débil afinidad. Durante este tiempo, HbAo se une a la resina, después de llevarse a cabo la mezcla con la resina, se utiliza el filtro separadorpara separar la resina del líquido sobrenadante el cual contiene la glicohemoglobina. El porcentaje de GHb es determinado por la medida de la abs a 415 nm, de la fracción glicoHb y Hb total, calculandoel coeficiente de absorbencias, y comparando con el calibrador de empleo.
REACTIVOS Y MATERIAL
• Tubo con 3ml de resina de intercambio ionico
• Filtro separador
• Lisina
• Calibrador
•Micropipetas de .02 ML y .10 ML
• Pipeta de .5 ml, 3 ml y 5 ml
• Tubos de ensaye
• Mezclador
PROCEDIMIENTO
1. Preparación de hemosilado
1.1. Coloque .5 ml del reactivo lisador en los tubos etiquetadoscomo calibrador, muestra, etc.
1.2. Coloque .1 ml de muestra de sangre dentro de los tubos etiquetados apropiadamente. Mezcle hasta que la lisis sea completa
1.3. Deje reposar 3 min.
2. Preparaciónde la glicohemoglobina
2.1. Antes de usarse mezcle bien la resina por inversión por lo menos 6 veces. Agite el frasco que contiene la resina entre cada toma de reactivo
2.2. Coloque .1 ml dehemolizado del paso A que contiene la resina
2.3. Coloque el filtro separador dentro del tubo aprox a 2 cm sobre el nivel del líquido.
2.4. Coloque los tubos en un mezclador por 5 min
2.5. retire lostubos y presione el filtro separador dentro del tubo hasta que la resina este compacta
2.6. vacia el liquido sobre nadante a otro tubo
2.7. onajusta el espectrofotómetro a 415 nm
2.8. lea y...