glucosa trinder
Páginas: 3 (506 palabras)
Publicado: 27 de febrero de 2014
GLUCOSA TRINDER (GOD-PAP)
La prueba oral de tolerancia a la glucosa consiste en la medición en serie de la glucosa plasmática antes y después de la ingesta de glucosa. La prueba se realiza en ayunode 8 a 12 horas. Se administran 75 gramos de sacarosa vía oral. La glucemia se determina cada 30 minutos durante 2 horas. Se requiere usar enzimas como hexocinasa o glucosa oxidasa (GOD) paraaumentar la especificidad de la prueba. La glucosa oxidasa oxida la β-D- glucosa a gluconolactona y peróxido de hidrogeno. Estos productos reaccionas a su vez con fenol y 4-aminofenazona en presencia deperoxidasa (POD) dando un colorante rojo violeta de quinoneimina en cantidad proporcional a la glucosa presente en la muestra.
Glucosa + O2 + H2O Ácido Glucónico + H2O2
2H2O2 + 4- Aminofenazona +fenol Quinoneimina + 4 H2O2
Metodología
1. Extraer 3 mL de sangre y colocarla en un tubo con anticuagulante. Mezclar suavemente.
2. Separar 100µL de esta sangre y colocarla en un tubo de 13 x 100para la determinación de Hemoglobina Glucosilada A1C.
3. Centrifugar el resto de la sangre a 2500rpm por 5 minutos para obtener el plasma
4. Rotular 3 tubos con la leyenda correspondiente: muestra,blanco y patrón
5. Añadir los componentes como se muestra:
MUESTRA
BLANCO
PATRÓN
REACTIVO
1.0 mL
1.0 mL
1.0 mL
PLASMA
0.01 mL
---
0.01 mL
6. Mezclar bien e incubar a 25°C durante 20minutos
7. Leer la absorbancia (A) de la muestra contra el blanco de reactivo a 500nm. El color es estable durante 60 minutos.
Resultados y Discusión
[Glucosa] = A (muestra) x 100mg/dL ÓA (muestra) x 5.55 mmol/L
A (patrón) A (patrón)
Se realizó con un equipo semiautomatizado por lo que se obtuvo un resultado directo obteniendo:Equipo
Glucosa mg/dL
1
157
2
460.3
3
48.8
4
155.5
5
174
6
604
Valores de referencia:
Suero/ Plasma (en ayunas) : 70- 100 mg/dL (3.89- 5.83 mmol/L)
Orina: 5-15 mg/dL (0.23 –...
La prueba oral de tolerancia a la glucosa consiste en la medición en serie de la glucosa plasmática antes y después de la ingesta de glucosa. La prueba se realiza en ayunode 8 a 12 horas. Se administran 75 gramos de sacarosa vía oral. La glucemia se determina cada 30 minutos durante 2 horas. Se requiere usar enzimas como hexocinasa o glucosa oxidasa (GOD) paraaumentar la especificidad de la prueba. La glucosa oxidasa oxida la β-D- glucosa a gluconolactona y peróxido de hidrogeno. Estos productos reaccionas a su vez con fenol y 4-aminofenazona en presencia deperoxidasa (POD) dando un colorante rojo violeta de quinoneimina en cantidad proporcional a la glucosa presente en la muestra.
Glucosa + O2 + H2O Ácido Glucónico + H2O2
2H2O2 + 4- Aminofenazona +fenol Quinoneimina + 4 H2O2
Metodología
1. Extraer 3 mL de sangre y colocarla en un tubo con anticuagulante. Mezclar suavemente.
2. Separar 100µL de esta sangre y colocarla en un tubo de 13 x 100para la determinación de Hemoglobina Glucosilada A1C.
3. Centrifugar el resto de la sangre a 2500rpm por 5 minutos para obtener el plasma
4. Rotular 3 tubos con la leyenda correspondiente: muestra,blanco y patrón
5. Añadir los componentes como se muestra:
MUESTRA
BLANCO
PATRÓN
REACTIVO
1.0 mL
1.0 mL
1.0 mL
PLASMA
0.01 mL
---
0.01 mL
6. Mezclar bien e incubar a 25°C durante 20minutos
7. Leer la absorbancia (A) de la muestra contra el blanco de reactivo a 500nm. El color es estable durante 60 minutos.
Resultados y Discusión
[Glucosa] = A (muestra) x 100mg/dL ÓA (muestra) x 5.55 mmol/L
A (patrón) A (patrón)
Se realizó con un equipo semiautomatizado por lo que se obtuvo un resultado directo obteniendo:Equipo
Glucosa mg/dL
1
157
2
460.3
3
48.8
4
155.5
5
174
6
604
Valores de referencia:
Suero/ Plasma (en ayunas) : 70- 100 mg/dL (3.89- 5.83 mmol/L)
Orina: 5-15 mg/dL (0.23 –...
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