“Hidrólisis Del Almidón Por Amilasa Vegetal”

“HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN POR AMILASA VEGETAL”

Introducción
En la tercer practica del modulo se realizo la hidrólisis del almidón por amilasa, en nuestro caso nos toco el ensayo A el cual se realizo con semillas de frijol germinados de 7 a 8 días.
Lo primero que hicimos fue hacer una molienda de los frijoles en el mortero usando 3 ml de agua destilada por cada gramo para después hacer unadilución 1:10 con solución amortiguadora de acetato PH 5.0 y después ponerla en hielo para mantenerla fría y se segmente.
Posteriormente preparamos un tubo con almidón 0.2% y solución CaCl-NaCl.
Después se prepararon 10 tubos con 1 ml de solución de yodo a cada uno, y a uno de estos agregamos 3ml de agua destilada el cual se utilizo para calibrar el espectrofotómetro al 100% de transmitancia.Con la solución preparada anteriormente de la enzima diluida agregar 1ml a cada uno de los tubos con yodo en periodos de cada 5 minutos, durante 40 minutos y agitarlos. Como siguiente paso se le agregaron 2ml de agua destilada y agitamos.
Por ultimo tomamos el valor de la absorbancia a 620nm en el espectrofotómetro.

Marco teórico
Cinética enzimática de la amilasa
La amilasa es unaenzima proteica que se encuentra en la saliva humana y cataliza la de gradación del almidón, que es un polisacárido o de reserva vegetas. El almidón esta formado por amilasa y la amilo pectina. La hidrolisis del almidón es catalizada por amilasas salivales y pancreáticas.
La cinética enzimática es el ampo de la bioquímica que se encarga de la medición cuantitativa de los índices de reaccionescatalizadas por las enzimas y del estudio sistemático de factores que afectan estos índices.
Las enzimas tienen como función incrementar la velocidad de una reacción. Las enzimas tiene tres características fundamentales son los catalizadores mas eficientes, se distinguen por su especificidad de acción y que son reguladas es decir es decir puede cambiar de un estado de baja actividad a uno de altaactividad
Para medir la actividad enzimática de la α- amilasa, se utiliza un test colorimétrico que detecta el almidón. Para ello se contará con una so lución de iodo duro de potasio (I2 /IK), ya que el almidón en presencia de esta solución ad quiere una coloración azulada característica. Esto tiene una explicación física: el iodo se coloca en el interior de la hélice que forma la amilasa (en lasregiones hidrofóbicas) forman do un complejo de color azul.
Cuando la α- amilasa actúa, de grada la amilosa, se des integra la hélice y por lo tanto en presencia de I2 /IK ya no dará una coloración azul.

Factores que afectan la germinación
Los factores que afectan a la germinación los podemos dividir en dos tipos:
| Factores internos (intrínsecos): propios de la semilla: * Madurez:una semilla es madura cuando ha alcanzado su completo desarrollo tanto desde el punto de vista morfológico como fisiológico. * Viabilidad de las semillas: La viabilidad de las semillas es el período de tiempo durante el cual las semillas conservan su capacidad para germinar. Es un período variable y depende del tipo de semilla y de las condiciones de almacenamiento. |
| Factores externos(extrínsecos): dependen del ambiente: * Humedad: La absorción de agua es el primer paso, y el más importante, que tiene lugar durante la germinación; porque para que la semilla recupere su metabolismo es necesaria la rehidratación de sus tejidos. * Temperatura: La temperatura es un factor decisivo en el proceso de la germinación, ya que influye sobre las enzimas que regulan la velocidad de lasreacciones bioquímicas que ocurren en la semilla después de la rehidratación. La actividad de cada enzima tiene lugar entre un máximo y un mínimo de temperatura, existiendo un óptimo intermedio. * Gases: La mayor parte de las semillas requieren para su germinación un medio suficientemente aireado que permita una adecuada disponibilidad de O2 y CO2. De esta forma el embrión obtiene la energía...