Hidrólisis del almidón por amilasa vegetal
MODULO: ENERGIA Y CONSUMO DE SUSTANCIAS FUNDAMENTALES.
PRACTICA No. 2
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS.
METODO DE BIURET
OBJETIVO:
•
•Manejar en el laboratorio el método de Biuret para determinar proteínas.
Observar y determinar experimentalmente el efecto del pH sobre las proteínas
de la leche.
GENERALIDADES:
•Investigación bibliográfica de los estudiantes sobre colorimetría y punto
isoeléctrico de proteínas.
MATERIAL POR EQUIPO:
1 probeta de 50 ml
2 gradillas
2 pipetas de 10 ml
3 pipetas de 5 ml
1 pipetade 1 ml
Tubos de 15 x 100 – 12 piezas
1 vaso de precipitados de 100 ml
12 tubos de 16 x 150
1 balanza granataria
Papel parafilm para 10 tubos
Si es necesario, 1 embudo y papel filtro.
1REACTIVOS POR EQUIPO:
Agua destilada.
Solución de ácido acético 0.1 N
Solución de acetato de sodio 0.1 N
Solución de caseína (concentración 4 mg/ml)
Reactivo de Biuret 50 ml.
NOTA: El éxito deesta práctica depende en gran parte de la limpieza del material.
Asegúrese que todo este perfectamente limpio.
APARATOS POR EQUIPO:
1 centrífuga clínica
1 balanza granataria
2 espectrofotómetros4 celdas
LOS ALUMNOS DEBERAN TRAER POR EQUIPO:
6 gr. Aproximadamente de leche en polvo descremada
1 plumón indeleble
Masking tape.
Jabón y franela para limpiar.
1. DETERMINACIÓN DEL PUNTOISOELÉCTRICO.
1.1. Preparación de una serie de tubos con solución amortiguadora de acetatos.
Coloca en una gradilla 6 tubos de 15 x 100 rotulados con números consecutivos.
Adiciona a cada tubo lassoluciones ácido acético y acetato de sodio que indica la
siguiente tabla:
TUBO
1
2
3
4
5
6
Solución ácido
acético 0.1 N
5 ml
4 ml
3 ml
2 ml
1 ml
Solución acetato
de sodio 0.1 N1 ml
2 ml
3 ml
4 ml
5 ml
El volumen final de cada tubo deberá ser de 5 ml.
2
2. PREPARACIÓN DE LA LECHE
2.1. En un vaso de precipitados de 100 ml disuelve 6 gr. De leche en polvo...
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