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1) TSI (Agar de Hierro y Triple Azúcar)

CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color rojo.
ALMACENAMIENTO
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 oC. Medio de cultivo preparado a 2-8 oC.
PROCEDIMIENTO
Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, con aguja deinoculación inocular el medio de cultivo, picando el fondo y ex- tendiendo sobre la superficie del mismo.
Incubación:
En aerobiosis, a 35-37 C durante 18- 24 horas.

Interpretación de Resultados.
Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas.
1) Superficie alcalina/ profundidad acida (pico rojo/ fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2) Superficieacida/ profundida acida (pico amarillo/ fondo amarillo): el microorganismo es no fermentador de azucares.
3) Superficie alcalina/ profundidad alcalina (pico rojo/ fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azucares.
4) La presencia de burbujas o la ruptura del medio de cultivo indican que el microorganismo produce gas.


2) LISINA HIERRO AGAR (LIA)
Antes
En el medio de cultivo, lapeptona y el extracto de levadura aportan los nutrimentos necesarios para el crecimiento bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicados de laproduccion de acido sulfhídrico. El purpura de bromocresol, esel indicador pH, el cual es de color a amarillo a pH igual o menos a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8.
Características del medio: color violeta.
Siembra: Por punción profunda con aguja de inoculación.
Suspender 35 g del medio deshidratado en un litro de agua destilada. Dejar embeber unos 15 minutos. Calentar cuidadosamente, agitando con frecuencia y hervir durante un minutohasta la disolución completa. Distribuir y esterilizar a 121C durante 15 minutos. Enfriar en pico de flauta dejando un fondo vertical apto para la punción.

Resultados:
Decarboxilacion de lisina:
Positivo: pico violeta/ fondo violeta.
Negativo: pico violeta/ fondo amarillo.
Diseminación de la lisina:
Pico rojizo/ fondo amarillo.
Producción de ácido sulfhídrico:
Prueba positiva:ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo).


3) Bilis Rojo Violeta
Antes:
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrimentos necesarios para el crecimiento bacteriana, las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicadorde pH.
Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, adificanelmedio y producen un viraje indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo purpura, de 1-2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona de bilis precipitada.

Medio preparado: Purpura rojizo.

SIEMBRA:
Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1ml de la muestradirecta o de la dilución apropiada, agregar aproximadamente 12-15 ml del medio de cultivo enfriado a 45C, agitar por rotación y dejar solidificar.
Luego agregar un sobre capa de medio de cultivo para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el crecimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de azucares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp.
Parapropósitos generales: sembrar en superficie, una ansada a partir de los tubos con gas de un medio para coliformes.

Después:
Resultados:
Microorganismos: enterobacterias fermentadoras de lactosa
colonias: rojas, de 1-2 mm de diámetro, con halo de precipitación rojizo
Microorganismos: enterobacterias no fermentadoras de lactosa
colonias: incoloras
Microorganismos: enterococcus spp.
Colonias:...