Hongos
Páginas: 11 (2691 palabras)
Publicado: 8 de marzo de 2011
PRÁCTICA V:
AISLAMIENTO Y RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS Y ANAEROBIAS FACULTATIVAS
Introducción:
Los microorganismos generalmente se encuentran en la naturaleza como poblaciones mixtas y para poder caracterizar e identificar un tipo de microorganismo, así como cuantificarlo, este debe de ser aislado y conservado como un cultivo puro o axénico, que significa que esta formado por unaespecie de microorganismo.
Marco Teórico:
Para el aislamiento de microorganismos se cuenta con varios métodos, entre los más usados están: siembra por extensión, siembra por estrías cruzadas, siembra por vertido en placa o en profundidad y siembra por diluciones.
Si se extiende una mezcla de células en una superficie de agar, de manera que cada célula crece formando una colonia independiente(formación o agrupación macroscópica visible de microorganismos en un medio sólido) cada colonia representa un cultivo puro. Una colonia se desarrolla en un medio y procede de una sola bacteria, espora o agrupación de microorganismos que sean viables, a los que se les denomina unidades formadoras de colonias (UFC). No todas las bacterias viables en una muestran pueden cultivarse in vitro, seestima que sólo crecen entre 20 y 50% de las especies presentes en el medio de cultivo. Esto es debido a que algunas de ellas viven en simbiosis obligad, o son inhibidas por algunos componentes de los medios. En general, el crecimiento celular se produce de forma más rápida en el extremo de la colonia. El crecimiento es más lento en el centro, produciéndose autolisis celular en las partes centrales queson las zonas más antiguas. Al parecer estas diferencias se deben a gradientes de oxigeno, nutrientes y productos tóxicos dentro de la colonia. Sin embargo en el extremo de esta, el oxigeno y los nutrientes son abundantes.
La siembra por extensión es una forma directa y fácil de conseguir colonias aisladas de cultivos puros. Consiste en hacer pasar un volumen pequeño de una mezcla microbianadiluida conteniendo entre 100 y 200 células, o menos, al centro de una placa de agar y se extiende uniformemente sobre la superficie con una varilla doblada de vidrio o asa de Diralsky (Diagrama 1). La suspensión se absorbe en el agar, dejando las células microbianas sobre la superficie. Las células dispersas desarrollan colonias aisladas. Como el número de colonias debería ser igual al número deorganismos de la muestra, este tipo de siembra puede usarse para conteo de población microbiana.
Las colonias puras se pueden obtener también mediante la siembra en estrías cruzadas. En la cual se pasa la mezcla microbiana a un extremo de la placa con un asa de inoculación o un hisopo y se extiende formando estrías sobre la superficie siguiendo uno de los posibles patrones recomendados (Fig. 1).En algunos puntos de este proceso, algunas células individuales se desprenden del asa al frotarla sobre la superficie, lo que permite el desarrollo de colonias separadas. En ambas técnicas mencionadas, un buen aislamiento, depende de la separación adecuada de las células individuales.
En el método de vertido en placa, las muestras diluidas se colocan en la caja Petri y enseguida se vierten elagar fundido en placa. Algunas colonias quedan embebidas en el agar y otras crecen en la superficie. Las colonias superficiales se extenderán y serán más grandes, así como pueden ser utilizadas para inocular un medio fresco y preparar cultivos puros.
El método de las diluciones consiste en hacer una serie de diluciones, generalmente decimales, de las cuales se toman alícuotas que se siembranen medios de cultivos sólidos ya sea depositando la muestra en la superficie y dispersándola uniformemente con una varilla de vidrio, o bien mezclando la alícuota con el medio fundido y vertiéndolo inmediatamente en la placa. Esta técnica es muy útil para el conteo microbiano ya que permite calcular el número de UFC contenidas en un mililitro de la dilución usada para inocular cada placa y se...
AISLAMIENTO Y RECUENTO DE BACTERIAS AEROBIAS Y ANAEROBIAS FACULTATIVAS
Introducción:
Los microorganismos generalmente se encuentran en la naturaleza como poblaciones mixtas y para poder caracterizar e identificar un tipo de microorganismo, así como cuantificarlo, este debe de ser aislado y conservado como un cultivo puro o axénico, que significa que esta formado por unaespecie de microorganismo.
Marco Teórico:
Para el aislamiento de microorganismos se cuenta con varios métodos, entre los más usados están: siembra por extensión, siembra por estrías cruzadas, siembra por vertido en placa o en profundidad y siembra por diluciones.
Si se extiende una mezcla de células en una superficie de agar, de manera que cada célula crece formando una colonia independiente(formación o agrupación macroscópica visible de microorganismos en un medio sólido) cada colonia representa un cultivo puro. Una colonia se desarrolla en un medio y procede de una sola bacteria, espora o agrupación de microorganismos que sean viables, a los que se les denomina unidades formadoras de colonias (UFC). No todas las bacterias viables en una muestran pueden cultivarse in vitro, seestima que sólo crecen entre 20 y 50% de las especies presentes en el medio de cultivo. Esto es debido a que algunas de ellas viven en simbiosis obligad, o son inhibidas por algunos componentes de los medios. En general, el crecimiento celular se produce de forma más rápida en el extremo de la colonia. El crecimiento es más lento en el centro, produciéndose autolisis celular en las partes centrales queson las zonas más antiguas. Al parecer estas diferencias se deben a gradientes de oxigeno, nutrientes y productos tóxicos dentro de la colonia. Sin embargo en el extremo de esta, el oxigeno y los nutrientes son abundantes.
La siembra por extensión es una forma directa y fácil de conseguir colonias aisladas de cultivos puros. Consiste en hacer pasar un volumen pequeño de una mezcla microbianadiluida conteniendo entre 100 y 200 células, o menos, al centro de una placa de agar y se extiende uniformemente sobre la superficie con una varilla doblada de vidrio o asa de Diralsky (Diagrama 1). La suspensión se absorbe en el agar, dejando las células microbianas sobre la superficie. Las células dispersas desarrollan colonias aisladas. Como el número de colonias debería ser igual al número deorganismos de la muestra, este tipo de siembra puede usarse para conteo de población microbiana.
Las colonias puras se pueden obtener también mediante la siembra en estrías cruzadas. En la cual se pasa la mezcla microbiana a un extremo de la placa con un asa de inoculación o un hisopo y se extiende formando estrías sobre la superficie siguiendo uno de los posibles patrones recomendados (Fig. 1).En algunos puntos de este proceso, algunas células individuales se desprenden del asa al frotarla sobre la superficie, lo que permite el desarrollo de colonias separadas. En ambas técnicas mencionadas, un buen aislamiento, depende de la separación adecuada de las células individuales.
En el método de vertido en placa, las muestras diluidas se colocan en la caja Petri y enseguida se vierten elagar fundido en placa. Algunas colonias quedan embebidas en el agar y otras crecen en la superficie. Las colonias superficiales se extenderán y serán más grandes, así como pueden ser utilizadas para inocular un medio fresco y preparar cultivos puros.
El método de las diluciones consiste en hacer una serie de diluciones, generalmente decimales, de las cuales se toman alícuotas que se siembranen medios de cultivos sólidos ya sea depositando la muestra en la superficie y dispersándola uniformemente con una varilla de vidrio, o bien mezclando la alícuota con el medio fundido y vertiéndolo inmediatamente en la placa. Esta técnica es muy útil para el conteo microbiano ya que permite calcular el número de UFC contenidas en un mililitro de la dilución usada para inocular cada placa y se...
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