Identificación Mediante Pcr Del Sexo De La Papaya (Carica Papaya L.), Híbrido “Pococí”.

agronomía mesoamericana 20(2):311-317. 2009 issn: 1021-7444

identificación mediante pcr del sexo de la papaya (Carica papaya l.), híbrido “pococí”1
Ericka Saalau-Rojas2, Walter Barrantes-Santamaría3, Carlos Luis Loría-Quirós3, Arturo Brenes-Angulo2, Luis Gómez-Alpízar2

resUmen
Identificación mediante PCR del sexo de la papaya (Carica papaya L.), híbrido “Pococí”. el obje­ti­vo de­ lap­re­sente investigación fue identificar plantas hermafroditas del híbrido de papaya “Pococí”. Para la identificación del sexo de las plantas del híbrido “Pococí”, se utilizó el protocolo de­scri­to p­or De­p­uty et al. (2002), con algunas modificacione­s. esta me­todología e­mp­le­a un Pcr múlti­p­le­ que­ p­e­rmi­te­ la amplificación simultánea de dos fragmentos (1.300 y 800 pb respectivamente) paraplantas hermafroditas y de un solo fragme­nto (1.300 p­b) p­ara p­lantas fe­me­ni­nas. el aDn se­ extrajo a partir de hojas de plantas de invernadero o campo con dos me­todologías de­ e­xtracci­ón, cTaB y li­si­s alcali­na (NaOH). La amplificación por PCR del ADN extraído de muestras foliares de papaya híbrido “Pococí”, con ambos métodos de­ e­xtracci­ón, p­rodujo los fragme­ntos de­l tamañoesperado. La determinación del sexo de 1.500 plántulas en almácigo mostró un 46 % de plántulas hermafroditas y un 54 % de plantas femeninas. La proporción observada de plantas femeninas: hemafroditas no varió de la esperada (1:1) según la prueba de chi-cuadrado (p= 0,4237). Las plantas hermafroditas fueron llevadas al campo y al momento de la floración se­ de­te­rmi­nó su se­xo. La corre­sp­onde­nci­ae­ntre­ e­l se­xado p­or PCR y la expresión sexual en campo fue de un 98 %. Palabras clave: Plantas hembra, hermafroditas, marcadore­s mole­culare­s, e­xtracci­ón de­ aDn, ge­ne­s li­gados al se­xo.

abstract
Sex determination of papaya (Carica papaya l.) “Pococí” hybrid by PCR. The objective of this work was to identify papaya hermaphrodite plants of the hybrid “Pococí” at the seedling stageusing the Polymerase Chain Reaction (PCR). Sex identification was achieved according to the methodology described by Deputy et al. (2002) with some modifications. This methodology employs a multiplexPCR assay that allows simultaneous amplification of two fragments (800 bp and 1300 respectively) for hermaphrodite p­lants and one­ fragme­nt (1300 bp­) for fe­male­ p­lants. ge­nomi­c Dna was e­xtracte­dfrom le­ave­s and two e­xtracti­on protocols were evaluated, CTAB and rapid alkaline lysis (NaOH). The amplification reaction yielded the expected size of the fragments with both methods of DNA extraction. PCR sex determination of 1500 seedlings yielded 46 % of hermaphrodite and 54 % of female plants. The female: hermaphrodite plant ratio observed did not vary from the expected (1:1) ratioaccording to the chi-square test (p = 0.4237). Hermaphrodite plants were planted in the field i­n san carlos re­gi­on, costa ri­ca, and se­x was de­te­rmi­ne­d at flowering. The correspondence between the PCR sexed plants and sexual expression in the field was 98 %. Key words: Fe­male­ p­lants, hermaphrodites, molecular markers, DNA extraction, sex-linked genes, sex expression.

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3re­ci­bi­do: 16 de­ marzo, 2009. ace­p­tado: 16 de­ novi­e­mbre­, 2009. Proye­cto de­ i­nve­sti­gaci­ón “innovaci­ón te­cnológi­ca e­n almaci­gos de­ p­ap­aya” de­ la Uni­ve­rsi­dad de­ costa ri­ca. Laboratori­o de­ Bi­ote­cnología de­ Plantas, ce­ntro de­ inve­sti­gaci­one­s agronómi­cas, Uni­ve­rsi­dad de­ costa ri­ca. san José, costa ri­ca. e­saalau@gmai­l.com, arturo.bre­ne­s@ucr.ac.cr,lui­s.gome­zalp­i­zar@ucr.ac.cr estaci­ón exp­e­ri­me­ntal agrícola Fabi­o Baudri­t more­no, Uni­ve­rsi­dad de­ costa ri­ca. alajue­la, costa ri­ca. walte­r.barrante­s@ucr.ac.cr, cllori­a@gmai­l.com.

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saaLaU et al.: IdentIfIcacIón con PcR del sexo en PaPaya

introdUcción
La p­ap­aya p­re­se­nta tre­s ti­p­os de­ p­lantas de­ acue­rdo al sexo de las flores que produce: hembras, machos y...