II

Facultad de Salud, Deporte y Recreación
Departamento de Ciencias Químicas y Biológicas
Cátedra: Microbiología y Parasitología
Sección de Laboratorio: D4





PRE-INFORME
PRACTICO N°2 DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
“Técnicas Básicas de siembra en Microbiología”




Autores:
Claudio Alegre Malebran
Catalina García García
Karen MárquezMayorga
Daniela López Campos
Profesor:
Leonardo Pavés Díaz
Ayudante de Laboratorio:
Mariela Araya Ortega
Fecha de entrega:
21 de septiembre de 2015
Objetivo principal de la actividad (5 ptos):

Conocer la utilidad de los principales medios de cultivo, identificando procedimientos de siembra y aislamiento de bacterias y, posterior análisis macroscópico deestas.

I. Indique la clasificación, utilidad y componentes principales de los siguientes medios de cultivo

Agar sangre: Es un medio en base a agar nutriente enriquecido con 5 a 10% de sangre ovina y a veces humana cuando son siembras en placa. Es usado para el cultivo de bacterias nutricionalmente exigentes, como Bordatella pertussis (agente causal de la tos convulsiva) y también paradetectar hemolisis al calentar el agar sangre a 70-80°C hasta obtener un color café, se obtiene otro medio de cultivo denominado agar chocolate que es más apropiado que el agar sangre para el crecimiento de cierto patógenos como por ejemplo Neisseria gonorrhoeae

Agar McConkey: Es un medio selectivo y diferencial ya que contiene sales biliares y cristal violeta para inhibir el crecimiento de Gram + loque sería selectivo y lactosa para distinguir aquellas bacterias que la fermentan de las que no y esto será diferencial. En agar McConkey las bacterias entéricas que utilizan lactosa (tales como E. coli) forman colonias rojas debido a que los productos acidicos que se forman a partir de lactosa afectan el indicador de pH del medio (rojo neutro); en cambio las especies entéricas que no usa lactosa(por ejemplo muchas cepas de Salmonella) forman colonias incoloras.

Agar nutriente (corriente) o Luria-Bertani (LB): Es un medio básico usado con propósitos generales para el cultivo de muchos tipos de bacterias. Puede ser enriquecido o hacerse selectivo por la adición de sustancias adecuadas.

Agar Sabouraud: Es un tipo de medio de cultivo selectivo que contiene peptonas. Es utilizado para elcultivo de hongos, especialmente dermatofitos, aunque también pueden desarrollarse en él cierto tipo de bacterias filamentosas tales como Nocardia.
II. Las muestras de bacterias que Ud. Recibió para sembrarlas y cultivarlas. Deben ser analizadas después de 24-48 horas en forma macroscópica. En base a sus observaciones llene las siguientes tablas y coloque el titulo adecuado a cada una de ellas.Tabla 1: Siembra en tubo de Agar inclinado (tubo Slant)


Descripción
Técnica con Agar tendido (Slant)

(Figura 1)

En nuestro cultivo de agar inclinado o Slant, se aprecia el crecimiento de microorganismos sobre la superficie del agar, en forma de pluma (ver figura 1).
Esto nos indica que es una bacteria aeróbica, (presencia de concentración normal de oxigeno), es decir, realizan respiracióncelular.



Tecnica con Agar plano

(Figura 2)

El resultado de este cultivo, se observa el crecimiento de microorganismos, por lo tanto nos dimos cuenta que la bacteria también creció en este medio anaeróbico (ver figura 2), esto quiere decir, que la bacteria Staphylococcus aureus corresponde a una bacteria anaeróbica facultativa, este tipo de bacterias son aquellas que pueden desarrollar unmetabolismo tanto respiratorio usando el oxígeno como fermentativo en ausencia de oxígeno.


Tabla 2: Siembra en medio líquido.


Descripción
Técnica de medio de cultivo liquido

(Figura 3)


Con este método de cultivo, solo se pudo observar unas pequeñas colonias bacterianas, muy transparentes, que solo se apreciaban al agitar suavemente el tubo de ensayo. (Ver figura 3)



Tabla 3: Separación de...