Informe 2





Universidad Andrés Bello
Facultad de Ciencias Biológicas
Laboratorio de Biología Celular
Profesores: Nicole Cortes A., Verónica Noches G.












TRABAJO PRÁCTICO N°2:


Microscopía II


BIO131













Autores:
Constanza Alcozer
Paula Asima
Francisca Gómez
David Sánchez
Maritza Tapia






-2015-




INTRODUCCIÓN

Como ya sabemos, en la microscopía, existen distintosmétodos o técnicas para lograr una imagen más clara (detallada) del objeto o célula observada. Técnicas como, por ejemplo, la tinción de la muestra a observar con distintos compuestos químicos (1). Pero también, existen otras técnicas que se ocupan para lograr esto, ligadas mayoritariamente a la parte física en la observación de la muestras, sin alterar la muestra propiamente tal. Estás técnicasconsisten básicamente en alterar los rayos de luz que inciden en la muestra de alguna forma, consiguiendo aumentar la interferencia de esta (que valles y picos de los rayos u ondas de luz no estén en fase), logrando obtener una imagen con mayor resolución, con mejor observación del relieve, o con mejor observación de las capas que presenta la muestra (2).
La microscopia, además de permitirnos observaren detalle objetos muy pequeños, también nos brinda otras dos herramientas, muy importantes: lograr contar la cantidad de partículas en un volumen determinado, y lograr determinar el tamaño de las partículas (2).
Gracias a esto, en éste trabajo se estudiarán estás características de la microscopia. Primero se preparará una muestra fresca de cabello humano, y se observará a través de unmicroscopio, generando un campo oscuro y posteriormente un cambio de fase. Después se observara el tamaño de glóbulos rojos y glóbulos blancos, de un frotis de sangre humana. Para terminar en el conteo de eritrocitos de una muestra a través de una cámara de Neubauer.
Al iniciar este trabajo práctico y después de revisar la bibliografía citada surgen algunas preguntas como: ¿En realidad hay una diferenciaentre ver una muestra a través de un microscopio tradicional, y uno con la técnica de campo oscuro y otro con la técnica de cambio de fases?, ¿Es posible lograr una relación con los tamaños de las partículas observadas y una escala, permitiendo conocer en definitiva el tamaño real de las partículas?, ¿Es posible que a través de un microscopio y una cámara de Neubauer se puedan contabilizarpartículas?
Estás preguntas nos llevan a una hipótesis que consiste en que efectivamente en el trabajo experimental, primero; a través de las distintas técnicas (de campo oscuro y contraste de fases) se logrará ver una mayor resolución y distintas características de las muestras observadas, segundo; se logrará medir el tamaño de las células, y tercero; se logrará contar la cantidad de partículas por unvolumen específico. En resumidas cuentas la hipótesis es que los resultados de los experimentos serán los mismos que los esperados después de estudiar la bibliografía.







OBJETIVOS

1. Observar preparaciones frescas generando un campo oscuro.
2. Conocer la técnica de recuento de glóbulos rojos a través de una cámara de Neubauer.
3. Determinar el tamaño celular, de las células presentes en unfrotis sanguíneo permanente.




MATERIALES Y METODOS

Primero se preparó una muestra fresca temporal con un cabello humano, se observó a través del microscopio óptico con un campo claro normal en un aumento de 4x, 10x y 40x objetivos. Luego se posicionó un círculo negro de papel -que previamente se había entregado dibujado en un papel negro que se tuvo que cortar- sobre la fuente de luz, que queda enla parte inferior del microscopio, permitiendo que la luz solo pasase a través de los bordes del círculo, se volvió a observar la muestra –ya con el campo oscuro- con un aumento objetivo de 10x, se observó, y se comparó con la imagen en campo claro de la misma muestra y en el mismo aumento, y finalmente se procedió a dibujar estas imágenes comparadas. Después el mismo círculo negro se puso en...