Informe Bioquimica

Espectrofotometría de Absorción Molecular

Medición cuantitativa del Poder Reductor de un Glúcido con el Método de Somogyi- Nelson.

Objetivo:

* Aplicar la Ley de Labert – Beer en ladeterminación colorimétrica de la glucosa.
* Determinación de la concentración de un soluto en una solución.

Hipótesis:

* La cantidad de glucosa presente en la solución es directamenteproporcional a la intensidad de la coloración azul presente en ella.
* La absorbencia depende de la solución patrón utilizado.

Datos Experimentales:

Se tomaron siete tubos de ensayo a los cualesse le adicionaron distintas cantidades de glucosa y agua, las cuales daban un volumen de 1mL, posteriormente se le adiciono a cada uno de los tubos de ensayo un 1mL de Somogyi, el cual torno lasolución de una tonalidad amarilla. Posteriormente se llevaron a baño de calentamiento por 20 minutos, teniendo cuidado con no agitarlo, al sacar los tubos de este baño se aprecia un cambio de tonalidad acafé oscuro. Luego de esto se dejaron enfriar los tubos a temperatura ambiente y se le adiciono 1mL de Reactivo de Nelson, la cual torno las soluciones de un color azul, si bien no todos dieron la mismatonalidad están dentro de la gana de los azules.
Finalmente vertimos el contenido de los 6 tubos en unos micro tubos para leer la absorbancia de cada muestra.

Las soluciones que introducimos alEspectrofotocolorímetro

Las soluciones que introducimos al Espectrofotocolorímetro

Espectrofotocolorímetro
Espectrofotocolorímetro
Seis Soluciones
Seis Soluciones

Muestra Problema y Blanco,Respectivamente
Muestra Problema y Blanco, Respectivamente

Registro de Datos:

Tubo | Glucosa Patrón (mL) | Agua (mL) | Somogyi (mL) | Absorbancia |
1 | 1 | 0.9 | 1 | 0.536 |
2 | 0.8 | 0.2| 1 | 0.436 |
3 | 0.6 | 0.4 | 1 | 0.342 |
4 | 0.5 | 0.5 | 1 | 0.264 |
5 | 0.3 | 0.7 | 1 | 0.147 |
6 | 0.1 | 0.9 | 1 | 0.062 |
Blanco | 0 | 1 | 1 | 0.536 |
Muestra Problema | - | - | 1...