Informe cubra de calibración (bioquímica)
MATERIALES
Espectrofotómetro.
Pipeta automática.
Punta de pipeta.
Cubetas.
Papel milimetrado.
Micropipeta de 500 µL y de 1000 µL.
Microtubos.
Suero N.
Suero P.
Vaso Precipitado.Agua destilada.
PROCEDIMIENTO
1- Solución estándar de concentración conocida.
2- Kit reactivo
3- Mezclar las soluciones con el reactivo yetiquetar los tubos
4- Agitar el tubo para colocarlo a baño maría durante 10 minutos
5- Calibrar el espectrofotómetro
6- Medir la absorbancia con el espectrofotómetro
1. A partir de losdatos entregados en la tabla de procedimiento, se procede a calcular la concentración estándar de cada solución.
2. En una gradilla se dispusieron de 5 tubos eppendorf, rotulados cada uno para cadasolución.
3. Con ayuda de la micropipeta se procede a verter en el tubo 0, 20μl de H2O junto con 1000μl del reactivo 1 para luego incubar por 5 minutos a 30°c, al transcurrir este tiempo seretira y se deposita 250μl del reactivo 2, para incubar nuevamente por 5 minutos a 30° c, al finalizar la solución se vierte en una cubeta para medir la absorbancia de ésta.
4. Del mismo modo que enel tubo 0 se realizan los mismos pasos en los tubos restantes. En el tubo 1 se vierten 4μl de solución estándar, 16μl de H2O y 1000μl de reactivo 1 para luego incubar y agregar 250μl de reactivo 2 alterminar la incubación se procede a medir la absorbancia.
5. En el tubo 2 se deposita 8μl de sol. Estándar, 12μl de H2O y 1000μl de reactivo 1, se incuba por 5 minutos a 30°c y se le agrega 250μl dereactivo 2 para incubar y luego medir la absorbancia.
6. En el tubo 3 se depositan 12μl de sol. Estándar, 8μl de H2O y 1000μl de reactivo 1 para incubar y luego agregar 250μl de reactivo 2, yllevar nuevamente a incubación por 5 minutos a 30°c, al finalizar se mide la absorbancia de este.
7. En el tubo 4 se agregan 16μl de sol. Estándar, 4μl de H20 y 1000μl de reactivo 1 para incubar por...
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