Informe Laboratorio Microbiologia

MICROBIOLOGIA DE AGUA
1. INTRODUCCIÓN
Los exámenes rutinarios del agua con fines
Sanitarios, están encaminados a detectar la presencia de coliformes, (un grupo de organismos no patógenos), que normalmente son encontrados en el intestino de las personas.
De ellos los más importantes son E. coli y Aerobacter aerogenes bacilos gram-negativos, no formadores de esporas, anaerobios facultativosy fermentadores de la lactosa.
Las pruebas que se efectuarán, las más ampliamente utilizadas en salud pública, son de 3 tipos: presuntiva, confirmativa y completa

2. OBJETIVOS

3.1 Objetivo general

Observar e identificar los tipos de colonias presentes en aguas contaminadas

3.2 Objetivos específicos

* Identificar el tipo de coliforme fecal que se presenta* Reconocer la gram-positiva o gram-negativa
* Preparar un medio de cultivo especifico con el procedimiento adecuado

3. MARCO TEÓRICO
E.M.B. Agar:
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familiaEnterobacteriaceae.

Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen unefecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas.
Formula en gramos por litro:
* Peptona - Fosfato dipotasico
* Lactosa - Agar
* Sacarosa - Eosina
* Azul de metileno
Caldo lactosado:
Se recomienda como prueba presuntiva para investigar la presencia de bacterias del grupo coliforme en agua, productos lácteos, etc.
Actualmente también está indicado para elpre enriquecimiento no selectivo en la búsqueda de Salmonella spp a partir de alimentos
Es un medio rico en nutrientes, y no contiene inhibidores del crecimiento bacteriano.
El extracto de carne y la peptona, son la fuente de carbono y nitrógeno, mientras que la lactosa es el hidrato de carbono. Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido y gas, y éste último se demuestra al usar lascampanas Durham.
Formula en gramos por litro:
* Extracto de carne
* Peptona
* Lactosa
Resultados:
* Escherichia coli
* K. pneumoniae
* Citrobacter freundii
* P. aeruginosa
* Salmonella typhimurium

4. METODOLOGÍA
4.1 Materiales
* Tubos de ensayo (9)
* Durhams (9)
* Beacker (2)
* Erlenmeyer 250 ml (1)
* Erlenmeyer 150 ml (1)
* Espátulade madera (1)
* Caja de Petri (3)
* Pipeta (1)
* Probeta 100 ml (1)
* Pinza metálica (1)
* Aza (1)
* Plancha de calentamiento
* Vidrio reloj
* Balanza analítica
* Propipeta
* Horno
* Baño maria
* Magneto (1)
* Varilla de extracción de imán (1)

3.2 Reactivos

* Agar EMB
* Caldo lactosado
Procedimiento Agar EMB
* Sepesa en el vidrio reloj 2.25 gr de Agar Blue en la balanza analítica, se adiciona al erlenmeyer de 150 ml
* Se agrega con la pipeta 60 ml de agua destilada
* Colocamos el Erlenmeyer en la plancha de calentamiento a 350°C, con agitación del magneto, se realizan tres hervores, luego se baja y se deja enfriar junto a la llama
* Adicionamos el agar de forma equitativa a las cajas depetri siempre junto a la llama para evitar su contaminación.
* Dejamos a temperatura ambiente por unos minutos y después llevados al refrigerador
* Pasadas 24 horas se esteriliza la aza y se sumerge dentro de uno de los tubos de ensayo de cada grupo que presenten mayor respiración de microorganismos (durja con mayor aire)
* Abrimos cada caja de petri cerca a la flama y rozamos en...