Informe

INFORME Nº3
TEMA: COLORACIÓN GRAM
1. OBJETIVOS
1.1. Conocer y aplicar la técnica de coloración a Gram diferentes muestras clínicas.
1.2. Diferenciar la morfología y disposición bacterianamediante coloración Gram.
1.3. Aplicar diferentes tiempos en la coloración Gram a fin de escoger el más conveniente para la identificación preliminar.
1.4. Adiestrarse en esta técnica básica

2.FUNDAMENTO
La coloración Gram desde su inicio hasta los tiempos actuales ha constituido un instrumento fundamental para la identificación bacteriana.
Distingue 2 tipos de bacterias totalmentediferentes: Gram positivas y Gram negativas.
La diferenciación de ambos grupos es de enorme importancia taxonómica. En el comportamiento como patógenos y en la sensibilidad antibacteriana difierensustancialmente, de ahí que la realización de una rápida coloración Gram, reviste fundamental importancia en la Bacteriología Clínica.
Las bacterias Gram positivas se tiñen de color azul-violeta.
Lasbacterias Gram negativas se tiñen de color rojo-rosado.

3. MATERIALES
Portaobjetos
Lámpara de alcohol
Asa y agujas de inoculación
Lápiz dermo.

4. REACTIVOS UTILIZADOS
Reactivos para lacoloración Gram (cristal violeta, lugol, alcohol cetona y safranina)
Aceite de inmersión

5. EQUIPOS UTILIZADOS
Microscopio

6. PROCEDIMIENTO
Marcar y realizar un extendido delgado de la muestraclínica o de una colonia sobre un portaobjetos y dejar secar.
Fijar el material de estudio a la placa, pasándola 2 o 3 veces por el mechero, evitando el calentamiento excesivo.
Enfriar la placa
Colocarla placa sobre un soporte
Aplicar el colorante cristal violeta por 1 minuto
Lavar con agua corriente
Cubrir con lugol de Gram por 1 minuto
Lavar con agua corriente
Cubrir la placa conalcohol cetona por 10-20 segundos
Lavar con agua corriente
Cubrir la placa con safranina por 1 minuto
Lavar con agua corriente
Dejar secar al aire
Observar con aceite de inmersión, objetivo 100X,...